小恒学术问答
» Heng
最后活动于2015-01-08
回复了主题 › western的时候,1.5mm的十个孔的well;能加多ul样啊?在线等。O(∩_∩)O谢谢
40ul,最多也加过60ul
« 2015-01-08
回复了主题 › 分子克隆的高手看过来呀,怎么样连接效率最高呢? 最近,目的基因老是连不上载体。跪求分析。
载体切过夜,连接过夜,连接过程中片段与质粒mol比3:1,连接效率高
« 2015-01-05
回复了主题 › 把病毒从-80拿出来是要先放着-20还是直接室温, 怎么样病毒效价会好?没有经验,谢谢啦!
放置冰上融化即可
« 2015-01-01
回复了主题 › 请问我把病毒打到小鼠里,怎么判断病毒到了我想要的部位呀?求解答。
如果看活老鼠,病毒带荧光看活体成像,小动物成像仪这个仪器就可以办到。如果处死小鼠,把组织做冰冻切片,在荧光显微镜下看可以看到荧光
« 2015-01-01
创建了主题 › 把病毒从-80拿出来是要先放着-20还是直接室温, 怎么样病毒效价会好?没有经验,谢谢啦!
把病毒从-80拿出来是要先放着-20还是直接室温, 怎么样病毒效价会好?没有经验,谢谢啦!
« 2015-01-01
创建了主题 › 腺病毒滴度测定
腺病毒滴度测定
« 2014-12-26
回复了主题 › 大家知道有没可查载体质粒酶切位点的网站?在线等,谢谢了!!!
到neb cutter或者restrictionmapper网站上看看,或者下个dnaman软件
« 2014-12-25
回复了主题 › 各位大神,请教一下pLVX-puro质粒图谱相关问题
1、慢病毒本身是RNA病毒,包装过程要转录,如果中间有polyA,转录提前终止,病毒就包不成了;2.慢病毒3‘UTR里有polyA的,可以稳定 3.后面pgk的也会独立启动表达,所以不会只形成一个转录本
« 2014-12-23
创建了主题 › 专家,公转之后如果有绿色荧光能说明包毒成功吗?
专家,公转之后如果有绿色荧光能说明包毒成功吗?
« 2014-12-18
回复了主题 › 腺病毒感染细胞,能够引起天然免疫反应吗?
先看看对照组病毒有没有激活天然免疫
« 2014-12-16
回复了主题 › 想用JURKAT来做蛋白水平的实验,为什么Jurkat感染不上呢。
Jurkat用retro+vsvg+G/P,或者lenti,或者汉恒生物的特殊腺病毒都很好转
« 2014-12-12
创建了主题 › 想用JURKAT来做蛋白水平的实验,为什么Jurkat感染不上呢。
想用JURKAT来做蛋白水平的实验,为什么Jurkat感染不上呢。
« 2014-12-12
回复了主题 › 我想请教一个慢病毒感染的问题:能不能在病毒感染的时候同时进行脂质体感染实验
那就先慢病毒感染,72hr后看效率,如果效率高就直接再转3k,如果效率低就筛下再转3k, 质粒表达时间短,所以要先转慢病毒
« 2014-12-07
创建了主题 › 慢病毒包装用的包装质粒 可以转DH5α吗?
慢病毒包装用的包装质粒 可以转DH5α吗?
« 2014-12-02
回复了主题 › 请教各位大神,腺病毒或慢病毒转染的细胞,能不能用报告基因技术来检测?
有荧光就看荧光,没荧光就免疫荧光
« 2014-11-25
回复了主题 › 想请问一下Pef1a-IRES-Neo载体中IRES是什么?
IRES是一段序列可以让你的目的蛋白和载体蛋白不形成融合
« 2014-11-24
创建了主题 › 受体里面一些位点突变对它功能的影响,之后如何感染
受体里面一些位点突变对它功能的影响,之后如何感染
« 2014-11-21
创建了主题 › 构建过表达模型,腺病毒慢病毒选择
构建过表达模型,腺病毒慢病毒选择
« 2014-11-17
创建了主题 › 请问要做连接的质粒和PCR回收产物是酶切过夜比较好还是3-4个小时就足够了呢 ?
请问要做连接的质粒和PCR回收产物是酶切过夜比较好还是3-4个小时就足够了呢 ?
« 2014-11-11
创建了主题 › 求分析用何种载体
求分析用何种载体
« 2014-11-10
回复了主题 › 为什么嘌呤霉素 筛选 慢病毒感染的细胞 空载长得挺好 过表达的都挂了呢?
过表达没包出来或滴度低。重新包毒吧,你瞬转下看看死不死,如果能转进去的话。ps对照包得出来不代表目的也能包出来,
« 2014-11-05
创建了主题 › 慢病毒浓缩,使用MILLIPORE,那种规格超滤器呢?
慢病毒浓缩,使用MILLIPORE,那种规格超滤器呢?
« 2014-10-29
回复了主题 › 请教大家一下,慢病毒包装相关
这对慢包系统而言是可以的
« 2014-10-22
回复了主题 › 小鼠的哪种细胞好转染?原代细胞的转染,大家有什么建议没?
n2a,神经细胞.原代细胞确实难转,用病毒感染。
« 2014-10-21
回复了主题 › 亲,请问包病毒的话,培养基加不加双抗啊
不加双抗。
« 2014-10-09
回复了主题 › 在哪查文献?
我个人喜欢在genecards上先查这个基因名,然后跳转到publication这个条目下,这里一般文章比较全。还找不到的话,可以看文章的参考文献一步一步往下查。百度学术用的比较少,谷歌学术还老是出问题。
« 2014-10-08
创建了主题 › 求各位实验室慢病毒包装的protocol
求各位实验室慢病毒包装的protocol
« 2014-09-28
回复了主题 › 腺病毒或慢病毒病毒能否通过血胎屏障进入胎鼠体内?
不可以通过屏障进入体内的
« 2014-09-03
创建了主题 › 我要研究A基因与动脉粥样硬化的关系,请问可以构建过表达A基因的腺病毒,然后尾静脉注射小鼠体内吗?
我要研究A基因与动脉粥样硬化的关系,请问可以构建过表达A基因的腺病毒,然后尾静脉注射小鼠体内吗?
« 2014-08-31
回复了主题 › 腺病毒怎么纯化?
腺病毒需要大量扩增,然后用氯化铯梯度离心纯化,操作比较复杂,没有相关经验不一定能做好。如果是只感染细胞,可以用非纯化的腺病毒直接感染,如果是病毒注射动物,则必须巾帼纯化!以下是腺病毒纯化的protocol,你可以看看!
« 2014-08-17

