小恒学术问答
» Heng
最后活动于2016-07-22
回复了主题 › 腺病毒的包装问题
可以传代，但估计细胞太密了导致细胞状态不好，会影响到滴度
« 2016-07-22
创建了主题 › lipo2000能转染小片段的RNA吗？谢谢~
lipo2000能转染小片段的RNA吗？谢谢~
« 2016-07-22
回复了主题 › 腺相关病毒打4-5w小鼠尾静脉用量问题
100ul一次就够了
« 2016-07-21
回复了主题 › 纯化的AAV用qPCR的方法测得的滴度偏高是什么原因？
测试前先用DNaseI消化半小时
« 2016-07-21
回复了主题 › Huvec加G418筛选稳定株一般浓度是多少？
建议做个浓度梯度筛选
« 2016-07-04
回复了主题 › 用慢病毒表达质粒转染细胞后挑单克隆，而不通过包装慢病毒可以吗？目的基因能整合到细胞基因组中吗？
质粒转进去也是随机整合，可以通过挑单克隆来获得稳转细胞系，但是效果不如慢病毒好
« 2016-06-27
创建了主题 › 用慢病毒表达质粒转染细胞后挑单克隆，而不通过包装慢病毒可以吗？目的基因能整合到细胞基因组中吗？
用慢病毒表达质粒转染细胞后挑单克隆，而不通过包装慢病毒可以吗？目的基因能整合到细胞基因组中吗？
« 2016-06-27
回复了主题 › 用三个质粒包装慢病毒时,哪些序列会被包装进病毒呢？如图所示。
LTR之间,如下图红色框框所示
« 2016-06-24
创建了主题 › 怎样鉴定用的是小鼠细胞株，研究的目标基因x，慢病毒成功转染进去的是human的对应基因？
怎样鉴定用的是小鼠细胞株，研究的目标基因x，慢病毒成功转染进去的是human的对应基因？
« 2016-06-22
创建了主题 › 有人用AAV感染过这几种细胞，求指导，谢谢 、
有人用AAV感染过这几种细胞，求指导，谢谢 、
« 2016-06-20
创建了主题 › 是否可以用蛋白浓缩用的超滤管来浓缩慢病毒？
是否可以用蛋白浓缩用的超滤管来浓缩慢病毒？
« 2016-06-16
创建了主题 › 各位高手看过来，下面几张图是用不同MOI感染细胞后的图，哪个MOI最适合？谢谢~
各位高手看过来，下面几张图是用不同MOI感染细胞后的图，哪个MOI最适合？谢谢~
« 2016-06-14
回复了主题 › pcDNA3.1/Hygro(-) 和pcDNA3.1/Hygro(+) 都是指的带hygro筛选标记吗？有什么区别？谢谢~
质粒名字后带正负的一般区别都只在于多克隆位点处的酶切位点顺序不同
« 2016-05-30
回复了主题 › 用腺病毒做大鼠脊髓某基因的过表达，怎么注射?
在体，局部注射腺病毒
« 2016-05-26
创建了主题 › 用腺病毒做大鼠脊髓某基因的过表达，怎么注射?
用腺病毒做大鼠脊髓某基因的过表达，怎么注射?
« 2016-05-26
回复了主题 › 病毒上清冻融一次再次感染细胞，效果不好
病毒反复冻融就会降低病毒的滴度，你不要上清冻融，如果当天浓缩不了就放4度好了
« 2016-05-17
创建了主题 › 慢病毒转染一般用多大的速度离心，以及离心时间？
慢病毒转染一般用多大的速度离心，以及离心时间？
« 2016-05-17
回复了主题 › 在小鼠肺、肝中目的基因高表达，有什么方法可以抑制？O(∩_∩)O谢谢
你是做肝脏和肺的基因干预，不同的脏器的基因转染方式和工具是不一样,适合的AAV血清型和转导方法也不一样,不能把肺和肝脏混在一起, 分开做，肝脏用相应AAV血清型，尾静脉或者门静脉注射感染,肺部就得用肺部适合的AAV血清型了，滴鼻或者气管注射。用AAV承载shRNA做干扰，或者承载Cas9做KO
« 2016-05-06
回复了主题 › 嘌呤霉素药筛稳转株
收集未死亡的细胞继续传代贴壁之后加入抗生素再杀,如果太少,等长起来再杀啊
« 2016-05-03
回复了主题 › 病毒感染RAW
腺病毒或者AVV，慢病毒很容易极化Raw，所以不推荐使用
« 2016-04-28
回复了主题 › 慢病毒感染目的细胞时，目的细胞为什么会死，并且几乎无存活的
检测一下病毒的滴度，同时做好对照设置一组不加病毒的细胞，这样可以排除细胞影响。滴度测完后，按一定梯度加到细胞里，根据结果选择最适的病毒滴度。
« 2016-04-27
创建了主题 › sd大鼠的活体转染
sd大鼠的活体转染
« 2016-04-27
创建了主题 › 慢病毒感染目的细胞时，目的细胞为什么会死，并且几乎无存活的
慢病毒感染目的细胞时，目的细胞为什么会死，并且几乎无存活的
« 2016-04-27
创建了主题 › 内皮祖细胞转染大鼠
内皮祖细胞转染大鼠
« 2016-04-15
回复了主题 › 慢病毒滴度测定
有两种方法：一是稀释计数法，二是定量PCR法
« 2016-04-13
创建了主题 › 慢病毒载体
慢病毒载体
« 2016-04-13
创建了主题 › 慢病毒放置
慢病毒放置
« 2016-04-07
回复了主题 › 细胞转染完质粒后做个免疫荧光
一般是建议先转染后爬片，因为转染后很多细胞weak丧失爬片能力,但是按你实验要求，其实最好先爬片
« 2016-04-05
创建了主题 › 腺病毒海马定位注射
腺病毒海马定位注射
« 2016-04-01
创建了主题 › 慢病毒包装对基因的大小限制吗？
慢病毒包装对基因的大小限制吗？
« 2016-03-31
