小恒学术问答
» Heng
最后活动于2016-03-22
创建了主题 › 转染带有GFP的质粒，什么时候可以观察GFP的表达？
转染带有GFP的质粒，什么时候可以观察GFP的表达？
« 2016-03-22
回复了主题 › 小鼠肝脏，注射病毒
肝脏用AAV，AAV感染效果肯定是目前所有载体里面最好的。但是沉默效果跟干扰序列关系很大
« 2016-03-21
创建了主题 › 慢病毒载体构建
慢病毒载体构建
« 2016-03-21
回复了主题 › 腺病毒重组的基因转染到真核细胞内后能够表达在细胞外吗?或者说转染到DNA上的基因能不能释放到细胞外呢？
蛋白是否分泌到胞外跟腺病毒无关，蛋白是分泌蛋白自己就会释放到胞外的,
« 2016-03-17
创建了主题 › 第一次稀释病毒
第一次稀释病毒
« 2016-03-17
回复了主题 › 包装好的病毒分装
直接使用新的、无菌的EP管分装即可，分装完成后冻在-80冰箱
« 2016-03-15
创建了主题 › 转染GFP LC3质粒后观察细胞自噬
转染GFP LC3质粒后观察细胞自噬
« 2016-03-15
创建了主题 › AAV怎么感染在体肾脏组织
AAV怎么感染在体肾脏组织
« 2016-03-13
创建了主题 › 一般腺病毒感染细胞，什么程度可以进行下一步实验？比如感染时间、状态
一般腺病毒感染细胞，什么程度可以进行下一步实验？比如感染时间、状态
« 2016-03-09
创建了主题 › Ad4型腺病毒感染A549，滴度只有10的4次方。以Ad4为骨架的质粒在A549细胞上包装病变能看到吗？
Ad4型腺病毒感染A549，滴度只有10的4次方。以Ad4为骨架的质粒在A549细胞上包装病变能看到吗？
« 2016-03-09
创建了主题 › 慢病毒滴度测定
慢病毒滴度测定
« 2016-03-03
回复了主题 › 小鼠尾静脉注射了AAV后，会产生AAV的抗体嘛? 小鼠如果反复注射AAV的效果是一样的吗？
会，不过AAV免疫原性比较小,当然不一样，如果反复注射，越往后效果会越来越不明显，不同的血清型免疫原性也不一样，这也要考虑
« 2016-03-01
创建了主题 › 病毒包装时收集48h后的病毒上清，是48h一直不换液还是24h换一次液？
病毒包装时收集48h后的病毒上清，是48h一直不换液还是24h换一次液？
« 2016-02-28
回复了主题 › rAAV2/1或rAAV2/5在体转染海马神经元的效果好吗？求大神指点~
用2/9或2/8的camKIIa启动子的AAV病毒, 2/1和2/5尽管能感染，但相比2/9和2/8还是差很多
« 2016-02-22
创建了主题 › rAAV2/1或rAAV2/5在体转染海马神经元的效果好吗？求大神指点~
rAAV2/1或rAAV2/5在体转染海马神经元的效果好吗？求大神指点~
« 2016-02-22
回复了主题 › 上调某基因的慢病毒注射到动物体内，该基因的表达上调后，然后这种上调作用会随着时间慢慢降低吗？
会，刚注射的前几天是表达急速上升，然后维持一段时间后慢慢下降，时间足够久的话，也会表达恢复，是细胞内反馈机制，检测到基因组异常，会去主动修正
« 2016-01-28
回复了主题 › 慢病毒转染细胞后荧光会持续多久？是不是转染成功后GFP荧光会一直存在？
也会掉的，看你感染效率了，如果开始的时候90%那么培养半年掉到50%左右也有可能
« 2016-01-28
创建了主题 › 药筛稳转株
药筛稳转株
« 2016-01-28
创建了主题 › 慢病毒转染效率很低的细胞 可以转染两次吗？求具体protocol
慢病毒转染效率很低的细胞 可以转染两次吗？求具体protocol
« 2016-01-28
创建了主题 › 慢病毒转染细胞后荧光会持续多久？是不是转染成功后GFP荧光会一直存在？
慢病毒转染细胞后荧光会持续多久？是不是转染成功后GFP荧光会一直存在？
« 2016-01-28
创建了主题 › AAV2感染293T，大约多长时间，可以检测mRNA和蛋白表达?
AAV2感染293T，大约多长时间，可以检测mRNA和蛋白表达?
« 2016-01-28
回复了主题 › Adeasy腺病毒包装系统可以在293A细胞中用吗?
不可以,需要使用Admax系统,PDC315就是Admax系统
« 2016-01-22
创建了主题 › 用腺病毒转染细胞的话，一般需要培养多长时间啊？O(∩_∩)O谢谢
用腺病毒转染细胞的话，一般需要培养多长时间啊？O(∩_∩)O谢谢
« 2016-01-20
回复了主题 › 腺病毒如果从-80°冰箱里拿出来用了一次，是否能再放回冰箱等以后再用？
能再放回冰箱等以后再用，可以在4度放一周之内，肯定越短越好的
« 2016-01-15
回复了主题 › 转染的时候，细胞死了一半，求分析原因？
moi大了，可以降低moi
« 2016-01-14
回复了主题 › 腺病毒过表达的基因，其蛋白一般在细胞内能表达多久呀？有没有表达值的曲线？谢谢~
蛋白一般在细胞内能表达2-4周, 曲线主要看细胞增殖能力，不同细胞增殖的能力的不同，曲线也就不同
« 2016-01-13
回复了主题 › 慢病毒可以转BMSC？就只做细胞，不做体内
MSC间充质干细胞，如果不做体内移植，用腺病毒就好
« 2016-01-12
创建了主题 › 293t细胞复苏后传几代就可以用来包病毒了？
293t细胞复苏后传几代就可以用来包病毒了？
« 2016-01-12
回复了主题 › 重组腺病毒感染293细胞，24小时后固定细胞做免疫荧光
标准流程是：病毒感染48h，后荧光下看，好的话然后固定（我们是2%PFA，30min），然后抗原修复，然后打孔半小时，然后封闭环境中孵育一抗16h，然后加入2者的分别的2抗，然后孵育2h，然后加染核染料孵育一下，洗脱后正常封片，然后拍照，抗原修复比打孔，封闭更重要
« 2016-01-08
创建了主题 › polybrene用什么稀释的呀，稀释到什么浓度保存，稀释后保存在多少度？
polybrene用什么稀释的呀，稀释到什么浓度保存，稀释后保存在多少度？
« 2016-01-08
