小恒学术问答
» Heng
最后活动于2016-10-18
回复了主题 › 求助各位大神，有没有关于慢病毒感染心脏组织的相关文献？
慢病毒不适合做在体,小鼠你应该用AAV
« 2016-10-18
回复了主题 › 如何确定包装病毒环节没有问题
一 测滴度，二滴度不够也能感染，只是效率问题,完全没感染上就不是滴度问题，而是包没包出来
« 2016-10-18
创建了主题 › 求助各位大神，有没有关于慢病毒感染心脏组织的相关文献？
求助各位大神，有没有关于慢病毒感染心脏组织的相关文献？
« 2016-10-18
回复了主题 › 一般情况下，腺病毒感染肝细胞能到达到多大比例？病毒一般至少能持续多久？
比例可以80%以上，持续三周没问题
« 2016-09-30
回复了主题 › 做慢病毒转染要不要筛单克隆？
单或多，要根据实验目的；如果要稳定长时间表达或者细胞亚定位或RNAi，建议单克隆筛选一下
« 2016-09-30
回复了主题 › 慢病毒包装后感染靶细胞，筛选后靶细胞荧光强度挺好的，为什么就是目的蛋白不表达？
一种是可能因为缺少kozak序列，需要重新设计引物。另一种是和kozak没有关系，一般是由于插入基因的特定功能造成含有该基因的细胞没有生长优势造成的
« 2016-09-30
创建了主题 › 请问有大神做过mirna antagomir在体转染的实验吗？
请问有大神做过mirna antagomir在体转染的实验吗？
« 2016-09-29
创建了主题 › 用pLVS质粒瞬转发现没效果，是这个载体不适合瞬转吗？
用pLVS质粒瞬转发现没效果，是这个载体不适合瞬转吗？
« 2016-09-19
回复了主题 › 新手，想请教大家一个问题。慢病毒不可以直接转染细胞吗？
可以感染细胞,病毒就是由质粒包装成的,没有病毒质粒，就没有病毒, 慢病毒感染的原理是把目的基因构建到慢病毒载体上，然后和包装质粒一起转进293细胞，在细胞内，他们会自己包装成一个病毒，此时的病毒是带有目的基因的，再用病毒感染目的细胞，就把目的基因带进目的细胞了
« 2016-09-05
创建了主题 › 大家觉得这个感染效率怎么样？
大家觉得这个感染效率怎么样？
« 2016-08-31
回复了主题 › 经PEG浓缩过的病毒能直接冻存于-80吗？PEG不用去除吗？
离心4度4000就可以，然后沉淀重悬，不用了去除，会溶解的d
« 2016-08-25
回复了主题 › 慢病毒感染PC12细胞效率高么？谢谢~
腺病毒比较适合，神经细胞都不太好感染,可以试试看，如果非要用慢病毒，建议摸索一下moi值，加太多细胞肯定扛不住
« 2016-08-11
回复了主题 › 用293T扩增腺病毒，是等细胞都飘起来再收集病毒吗？
变圆就可以了收病毒了
« 2016-08-10
回复了主题 › 转染细胞的质粒是用水洗脱还是试剂盒自带的TE洗脱？有区别么？谢谢`
转染的质粒一般用水洗脱，没有用TE洗脱过，据说用TE似乎影响也不显著
« 2016-08-10
创建了主题 › 用293t包装慢病毒，lipo3000，三质粒系统，第二天细胞全飘了，求大神分析原因。
用293t包装慢病毒，lipo3000，三质粒系统，第二天细胞全飘了，求大神分析原因。
« 2016-08-08
回复了主题 › 质粒载体可以用于动物实验吗？感染能力可以吗？
可以做，和转染试剂一起注射,但是效率不好,在体实验为什么不选择AAV,很多细胞质粒都感染不好,何况是在体，也可以试试腺病毒
« 2016-08-05
回复了主题 › 用嘌呤霉素筛选稳转细胞的话，大概筛多少天比较合适呢？
一周,三分之二比较好一点,半浓度会丢失的比较快
« 2016-08-05
回复了主题 › 用病毒感T细胞六天后状态就不好了，这是为什么？
跟t细胞状态有关系，
« 2016-08-05
回复了主题 › 如图，使用PEG浓缩后PBS重悬加到细胞里，显微镜下观察一团团的、黑点的东西，这是啥？
病毒集落，病毒多了，
« 2016-08-03
回复了主题 › 普通质粒载体和慢病毒载体有什么区别?
慢病毒载体是一类规定了功能方向的载体，它的构建使用了慢病毒的一些元件，最终的目标是进入动物细胞体内，进行一个稳定的表达。
« 2016-08-03
创建了主题 › 用TCID50法测病毒滴度，加维持液观察5-7天，这7天内需要换液吗？
用TCID50法测病毒滴度，加维持液观察5-7天，这7天内需要换液吗？
« 2016-08-02
回复了主题 › 在稳定细胞系中再瞬转一个质粒，会有效果吗？
靶序列没引入RNAi-resistant同义突变的话，外源的也是会降低的
« 2016-08-01
创建了主题 › 质粒转染操作步骤如何？
质粒转染操作步骤如何？
« 2016-08-01
回复了主题 › 病毒蛋白放4度会不会降解？
不能放太久,能尽快浓缩什么的就尽快浓缩,当天或者隔天处理就最好,这里的时间是指距离最后一次收毒的时间
« 2016-07-29
回复了主题 › 求专门表达膜蛋白的，细胞膜定位慢病毒载体
细胞膜定位和病毒载体没有关系，是和表达的基因片段有关，一般要含信号肽片段
« 2016-07-29
创建了主题 › 求感染悬浮细胞的方法
求感染悬浮细胞的方法
« 2016-07-27
回复了主题 › 如果细胞慢病毒感染带GFP的阴性对照病毒能感染进去，那带目的片段的慢病毒就一定能感染进去吗？
目的片段后面有gfp的话直接感染进去看看gfp有没有表达就可以了,阴形对照转进去不能说明你的目的片段能转进去的，虽有参考意义啊，但不能绝对说明
« 2016-07-26
创建了主题 › 慢病毒空载体与空白对照组比较，会对基因表达抑制，空白对照组还要保留吗？thanks
慢病毒空载体与空白对照组比较，会对基因表达抑制，空白对照组还要保留吗？thanks
« 2016-07-26
回复了主题 › 如图，PI染色测的一个慢病毒感染后稳定细胞系的周期怎么是这样子的。G1期看的不清楚啊? 跪求大神分析
Sub G1期细胞太多，说明细胞凋亡或碎片太多，G0/G1期曲线不平滑，说明检测细胞数目不够，横坐标200处无峰，说明G2/M细胞比例很低，细胞状态不佳，个人建议，把细胞养好了重做
« 2016-07-25
创建了主题 › 用慢病毒感染细胞，嘌呤霉素筛选后得到的阳性细胞株，是不是会一直表达目的基因？谢谢~
用慢病毒感染细胞，嘌呤霉素筛选后得到的阳性细胞株，是不是会一直表达目的基因？谢谢~
« 2016-07-25
