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小恒学术问答 » 分类 » CRISPR/Cas9
小脑斧123

请问用CRISPR-Cas9做敲入时，我订购的donor质粒同源臂序列前面为什么还带启动子？难道需要转录才能成为模板吗？

sgRNA 小脑斧123 •  2024-06-21 • 最后回复来自 biothinker001
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小脑斧123

2、我们用CRISPR-Cas9构建了一株敲除株，现在想过表达被敲除的基因，请问过表达进去的基因还会被CRISPR-Cas9继续敲掉吗？

sgRNA 基因敲除 小脑斧123 •  2024-06-21 • 最后回复来自 biothinker001
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落落

用CRISPR/Cas9做基因敲除，定制的慢病毒（lentivirus），分了两个载体，一个Cas9载体和一个gRNA载体。之前用空载慢病毒摸索过目的细胞的最佳moi，是50，两个病毒载体都用moi=50感染目的细胞吗？

cas9 MOI sgRNA 慢病毒 落落 •  2023-08-17 • 最后回复来自 下一班
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lemons

应该在 sgRNA 中包含 PAM 序列吗？

sgRNA 基因敲除 lemons •  2023-08-15 • 最后回复来自 减肥呀减肥呀
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下一班

我想在HepG2里做FXR敲除，不是移码突变，要在蛋白层面直接检测不出FXR蛋白的话怎么做比较好？

基因敲除 下一班 •  2023-06-09 • 最后回复来自 炫彩大摆锤
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春暖花开

293T细胞感染问题

sgRNA 基因敲除 细胞 细胞转染 质粒 春暖花开 •  2023-05-11
减肥呀减肥呀

敲入和敲除有什么不同

sgRNA 减肥呀减肥呀 •  2023-05-10 • 最后回复来自 橘子
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炫彩大摆锤

用crispr做knock in实验，插入一个荧光标签蛋白，但最后去看混合克隆荧光的时候，都没有荧光，这要怎么办？

sgRNA 炫彩大摆锤 •  2023-05-04 • 最后回复来自 下一班
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炫彩大摆锤

我想做基因敲除（ko，knocout），敲掉肺部巨噬细胞表面的ffar2，但我查了一下，这个蛋白是7次跨膜蛋白，会不会增加敲除难度啊？

sgRNA 基因敲除 细胞 炫彩大摆锤 •  2023-03-09 • 最后回复来自 下一班
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biothinker001

基因编辑实验中如何避免脱靶效应？

脱靶 biothinker001 •  2023-02-24 • 最后回复来自 小脑斧123
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biothinker001

PCR产生的U6 sgRNA表达盒或携带适当sgRNA的pSpCas9质粒，哪种sgRNA表达方法更有效？

启动子 biothinker001 •  2023-02-24 • 最后回复来自 小脑斧123
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biothinker001

应该使用crRNA+tracrRNA还是sgRNA构建载体呢？

sgRNA biothinker001 •  2023-02-24 • 最后回复来自 小脑斧123
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biothinker001

1、CRISPR-Cpf1与CRISPR-Cas9有何不同？

cas9 biothinker001 •  2023-02-24 • 最后回复来自 小脑斧123
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小脑斧123

敲除单克隆细胞构建成功的标准是什么？

sgRNA 基因敲除 小脑斧123 •  2023-02-17 • 最后回复来自 biothinker001
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橘子

dCas9区别于Cas9 的是什么？

cas9 sgRNA 基因敲除 橘子 •  2023-02-14 • 最后回复来自 减肥呀减肥呀
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biothinker001

HDR模板（质粒或ssODN）是否包含sgRNA靶位点？

knockin biothinker001 •  2023-02-10 • 最后回复来自 小脑斧123
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biothinker001

SpCas9中的CBh启动子在什么细胞系中起作用吗？

启动子 biothinker001 •  2023-02-10 • 最后回复来自 小脑斧123
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biothinker001

应该在sgRNA中包含PAM序列吗？

sgRNA biothinker001 •  2023-02-10 • 最后回复来自 小脑斧123
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biothinker001

在进行gRNA时候，20 bp目标位点不是以G开头，能用G替换第一个碱基吗？

gRNA biothinker001 •  2023-02-10 • 最后回复来自 小脑斧123
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炫彩大摆锤

想自己设计sgRNA，有什么需要注意的吗？

sgRNA 基因敲除 炫彩大摆锤 •  2023-02-09 • 最后回复来自 下一班
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分类：CRISPR/Cas9
CRISPR/Cas9

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