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介ç»ï¼š

æœ€åŽæ´»åŠ¨äºŽ20 å¤©å‰
回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º å¦‚何筛选稳转株?

æœ‰ä¸¤ç§æ–¹æ³•ï¼Œä¸€ç§æ˜¯é€šè¿‡çœŸæ ¸ç»†èƒžæŠ—性è¯ç‰©ç­›é€‰ï¼›ä¸€ç§æ˜¯è®©ç»†èƒžå¸¦ä¸Šè§å…‰ä¿¡å·ï¼Œåˆ©ç”¨æµå¼ç»†èƒžä»ªåˆ†é€‰å¾—到è§å…‰ä¿¡å·é˜³æ€§çš„细胞,扩大培养

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回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º ç—…毒应该怎么ä¿å­˜å‘¢ï¼Ÿä¿å­˜å¤šé•¿æ—¶é—´ï¼Ÿèƒ½å¤Ÿåå¤å†»èžç—…毒å—?

如果是短期内使用,4℃å¯ä»¥ä¿å­˜ä¸€å‘¨å·¦å³ã€‚

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回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º ä»€ä¹ˆæ˜¯MOI?如何根æ®MOI计算è¦åŠ ç—…æ¯’çš„ä½“ç§¯?

MOI(multiplicity of infecti

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回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º mRNAæ•²é™¤éªŒè¯æ—¶PCR与WB蛋白结果ä¸ä¸€è‡´è¯¥ä¿¡è°å‘¢ï¼Ÿ

åŸºå› æ•²é™¤ä¸€èˆ¬åˆ†ä¸ºä¸¤ç§æƒ…å†µï¼šä¸€ç§æ˜¯æŠŠç›®çš„基因的DNA外显å­ç¼–ç åºåˆ—å…¨éƒ¨æ•²é™¤ï¼›ç¬¬äºŒç§æ˜¯æ•²é™¤å¤–显å­ä¸Šéƒ¨åˆ†ç¼–ç è›‹ç™½çš„åºåˆ—,因为敲除的外显å­åºåˆ—为éžä¸‰çš„æ•´æ•°å€ï¼Œæ‰€ä»¥è¿™ç§æƒ…况会造æˆè›‹ç™½ç¿»è¯‘ç§»ç çªå˜ï¼Œä»Žè€Œè¿›ä¸€æ­¥å®žçŽ°äº†ç›¸åº”è›‹ç™½åŠŸèƒ½çš„æ•²é™¤ã€‚å› æ­¤å¦‚æžœé€šè¿‡å¯¹ç›®æ ‡åºåˆ—进行

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«  29 å¤©å‰
«  29 å¤©å‰
创建了主题  â€º Lip2000å’ŒLip3000的区别是什么?


«  29 å¤©å‰
回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º 2.设计qPCR引物需ä¸éœ€è¦è·¨å†…å«å­è®¾è®¡ï¼Ÿ

qPCR引物最好跨内å«å­è®¾è®¡

«  2023-08-23
回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º æ¶ˆåŒ–细胞所用的胰蛋白酶怎么选择?其æˆåˆ†ä¸­çš„EDTA有什么作用?

è´´å£ä¸ç‰¢å’ŒåŠè´´å£ç»†èƒžå°½é‡ä½¿ç”¨æµ“度0.05%ä¸å«EDTA的胰酶

«  2023-08-23
创建了主题  â€º å¦‚何选择细胞培养瓶?


«  2023-08-17
«  2023-08-17
回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º ç»†èƒžè½¬æŸ“效率低的原因是什么呢?

å½±å“è½¬æŸ“æ•ˆçŽ‡çš„å› ç´ ä¸»è¦æœ‰ä»¥ä¸‹å‡ ç‚¹ï¼š

细胞因素,细胞的状æ€å¯¹è½¬æŸ“效率的影å“较大。è¦ç¡®ä¿ç»†èƒžæœªè¢«æ±¡æŸ“以åŠç»†èƒžå¤„在对数期。如果是贴å£ç»†èƒžçš„è¯ï¼Œè´´å£çŽ‡åº”è¯¥åœ¨50%~70%。转染时细胞密度过高或者过低都会导致转染效率é™ä½Žï¼Œä¹ƒè‡³è¡¨è¾¾æ°´å¹³å低。

«  2023-05-19
回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º ç»†èƒžè½¬æŸ“åŽå¦‚何进行转染效率的验è¯ï¼Ÿ

一般在转染24-72h之间å¯ä»¥è¿›è¡Œè½¬æŸ“效率的观察验è¯ã€‚

最简å•直接的方法是通过è§å…‰è§‚察。一般å¯ä»¥é€šè¿‡è´¨ç²’载体上的è§å…‰è›‹ç™½åŸºå› ï¼Œæˆ–者å°å¹²æ‰°RNA带的è§å…‰åŸºå›¢ï¼Œæ¥é€šè¿‡è§å…‰æ˜¾å¾®é•œè§‚察细胞

«  2023-05-19
«  2023-05-19
回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º éžå¸¸è§„的转染体系如何æ“作?

当多质粒共转染时,å¯ä»¥å°†è´¨ç²’按照一定的比例进行混åˆï¼Œä¹‹åŽæ ¹æ®æ ¸é…¸æ€»é‡å†ä¸Žè½¬æŸ“试剂按照åˆé€‚的比例混åˆé…ç½®å³å¯ã€‚

当需è¦DNAå’ŒRNA共转染时,å¯ä»¥ä½¿ç”¨DNA转染试剂,如果å•独转RNA,建议使用RNA专用转染试剂。

«  2023-05-19
回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º ç»†èƒžè½¬æŸ“试剂如何选择?

针对siRNA的转染å¯ä»¥é€‰æ‹©RNA专用转染试剂RNAFit。针对质粒DNA的转染å¯ä»¥é€‰æ‹©LipoFiter转染试剂,改转染试剂适用于普通细胞系转染,具有低细胞毒性的特点。高级版的LipoFiter 3.0高效转染试剂,适用于普通细胞系和难转染细胞系,具有æžé«˜çš„转染效率。如果有慢病毒包装的实

«  2023-05-19
回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º è¿›è¡Œç»†èƒžè½¬æŸ“åŽå¦‚何验è¯è½¬æŸ“效率?

一般在转染24-72h之间å¯ä»¥è¿›è¡Œè½¬æŸ“效率的观察验è¯ã€‚

最简å•直接的方法是通过è§å…‰è§‚察。一般å¯ä»¥é€šè¿‡è´¨ç²’载体上的è§å…‰è›‹ç™½åŸºå› ï¼Œæˆ–者å°å¹²æ‰°RNA带的è§å…‰åŸºå›¢ï¼Œæ¥é€šè¿‡è§å…‰æ˜¾å¾®é•œè§‚察细胞

«  2023-04-07
回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º ç»†èƒžè½¬æŸ“时是å¦éœ€è¦ä½¿ç”¨æ— è¡€æ¸…ã€åŒæŠ—的培养基?

血清一度曾被认为会é™ä½Žè½¬æŸ“效率,在开始准备DNA和阳离å­è„‚质体试剂稀释液时è¦ä½¿ç”¨æ— è¡€æ¸…çš„åŸ¹å…»åŸºã€‚è¡€æ¸…ä¸­å«æœ‰å¤§é‡çš„蛋白质,在转染过程中,带负电的蛋白质å¯èƒ½å¹²æ‰°é˜³ç¦»å­è„‚质体/阳离å­èšåˆç‰©å¯¹æ ¸é…¸çš„å¸é™„,影å“转染效率。但在å¤åˆç‰©å½¢æˆåŽï¼Œåœ¨åŠ å…¥ç»†èƒžä¸­å‰å¯ä»¥åŠ å…¥è¡€æ¸…ã€‚å½“ç„¶ï¼Œæœ€å¥½æ˜¯æŒ‰ç…§è½¬æŸ“è¯•å‰‚è¯´æ˜Žä¹¦çš„è¦æ±‚æ¥è¿›è¡Œæ“作。

«  2023-04-07
回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º è½¬æŸ“å‰ç»†èƒžéœ€è¦æ€Žæ ·çš„状æ€å’Œå¯†åº¦å‘¢ï¼Ÿ

细胞的生长状æ€ä¼šç›´æŽ¥å½±å“转染效果。转染å‰ç»†èƒžæœ€å¥½ç»è¿‡1-2æ¬¡ä¼ ä»£ï¼Œç»†èƒžè‰¯å¥½çš„ç”Ÿé•¿çŠ¶æ€æœ‰åŠ©äºŽæé«˜è½¬æŸ“效率。有些细胞系传代很多次还能够ä¿è¯å¾ˆé«˜çš„转染效率,而其他一些细胞系则传代很少次数转染效率就有显ç€é™ä½Žï¼Œå€¼å¾—注æ„的是,贴璧细胞一旦长满就ä¸å®¹æ˜“转染了。

用于转染的细胞密度根æ®ä¸åŒçš„细胞类

«  2023-04-07
回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º ç»†èƒžè½¬æŸ“剿 ¸é…¸å¦‚何准备 ?

å¤–æºæ ¸é…¸çš„è´¨é‡ç›´æŽ¥å½±å“到转染效率从而影å“到实验结果。

一般æ¥è¯´ï¼Œç”¨äºŽè½¬æŸ“级别的质粒一定è¦é«˜çº¯åº¦ã€é«˜æµ“度ã€ä¸”æ— å†…æ¯’ç´ ã€‚æµ“åº¦è¦æ±‚ä¸ä½ŽäºŽ500ng/ul,1000 ng/ul为宜,OD260/280>1.8。

«  2023-04-07