小恒学术问答
» 小脑斧123
最后活动于2024-08-26
创建了主题 › GFP、EGFP、 ZsGreen 有什么区别？
« 2024-08-26
创建了主题 › 什么是分子克隆（Molecular cloning）？
« 2024-08-26
创建了主题 › 克隆载体和表达载体的区别？
« 2024-08-26
« 2024-08-26
回复了主题 › 不同种属间的基因过表达与干扰是否可以通用？比如在人的细胞里面过表达小鼠的基因
这种情况首先需要比对两个物种的基因核苷酸序列以及碱基序列，如果一致，则过表达与干扰都可以通用；如果碱基序列不一致，但同源性极高，
« 2024-07-25
回复了主题 › 过表达蛋白时，加蛋白标签（tag）的目的是什么？
蛋白标签（protein tag）是指利用 DNA 体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白质，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。
« 2024-07-25
« 2024-07-25
« 2024-07-25
回复了主题 › circRNA 的过表达是如何实现的?
CircRNA是反向剪接形成的环装RNA，这种过程是可以人工模拟的，常见的过表达载体如质粒、慢病毒、腺病毒、
« 2024-05-24
回复了主题 › AAV为什么不适合作为载体做体内敲除？
AA
« 2024-05-24
回复了主题 › 为什么Cas9 慢病毒滴度不高？主要原因是什么？
Cas9 滴度不高主要原因是基因太大了（cas9 有
« 2024-05-24
回复了主题 › GFP、EGFP、 ZsGreen都是绿色荧光蛋白吗？有啥区别？
GFP、EGFP、
« 2024-05-24
创建了主题 › Sponge 海绵体如何才能发挥其长效抑制功能？
« 2024-05-17
创建了主题 › miRNA 的干扰能否在 qpcr 水平检测出？
« 2024-05-17
« 2024-05-17
« 2024-05-17
回复了主题 › 当一个基因存在多个转录本时，应当如何选择转录本进行基因过表达实验？
（1）
« 2024-04-19
« 2024-04-19
回复了主题 › lncRNA的敲低有哪些策略？
（1）
« 2024-04-19
回复了主题 › lncRNA的敲除有哪些策略？
目前主流的lncRNA敲除方法主要有三种：全基因座敲除、敲入poly（
« 2024-04-19
创建了主题 › 细胞永生化（cell immortalization）怎么做？
« 2024-03-29
« 2024-03-29
« 2024-03-29
« 2024-03-29
回复了主题 › 不同种属间的基因过表达和干扰病毒是否可以通用？
干扰首先需要比对两个物种的基因的转录本序列，如果干扰的靶点完全互补，在物种基因组上是唯一的，干扰很可能是有效果的，可以去验证一下看看敲低效率；如果有一个以上的碱基是不同的，即便靶点是特异的，敲低效率会很低。
« 2024-03-14
回复了主题 › 如果我想做融合蛋白，需要怎么连接两个蛋白不让两个蛋白互不干扰？
融合蛋白是将两个目的基因连在一起的，第一个基因的终止密码子需要去掉，为了最大程度的缓解两个蛋白之间的互相影响，通常会在两个蛋白之间加上
« 2024-03-14
回复了主题 › 敲除大单克隆株是不是直接通过抗性筛选就可以了？
不是的，通过抗性筛选可以将为转染成功的细胞杀死，留下的都是转染成功的细胞。但转染成功的细胞并不意味着敲除成功，Cas9 对靶基因的编辑会导致
« 2024-03-14
回复了主题 › 我想敲除一个细胞系的基因，常见的方法，工具有哪些？
目前最常用的方法是利用crispr-cas9的技术进行基因的敲除，需要将cas9蛋白和gRNA递送到细胞核中。递送的方法有质粒法，病毒法和蛋白法
« 2024-03-14
« 2024-02-29
« 2024-02-29
