稳转株可以稳定遗传的，没有固定的代数，构建好的稳转株用嘌呤霉素维持下就可以，直接在培养基中加一定浓度的嘌呤霉素，浓度一般是筛选浓度的一半。实验周期长的话，细胞最好2个月换一批新的。
可以用带转运肽的Gcamp6跟普通Gcamp6，分别带两种不同的荧光，这得转两个载体进去，腺病毒（adenovirus）感觉比较常用。
可以是可以，有文献用siRNA和质粒转染的，但是神经元细胞本身比较难转染，建议还是用病毒做。
我给ac16细胞转了sirna，带cy3标签，我们这边有测定荧光吸光度的酶标仪，可以用来测定转染效率吗？
我构建了一个miRNA过表达的慢病毒，那之前检测细胞miRNA表达的时候逆转录用的茎环引物还可以用在用了慢病毒的细胞上吗？
使用带luc标签的腺相关病毒AAV做动物实验，想问一下把动物处死了，取材还可以拍荧光吗？
想做基因敲除，敲掉肺部巨噬细胞的一个表面蛋白ffar2，但我查了一下，这个蛋白是7次跨膜蛋白，会不会增加敲除难度啊？
可以的，但是背景太高，灵敏度低，发文章还是推荐用生物发光(Luc)。
iu/ml是浓度单位。指一种物质在液体中的浓度，即每公升液体中所含国际单位的量。由于有的药品含量不稳定必须与标准品进行比较就采用效价用IU（国际单位）来表示。应该是个任意单位，不是固定的
对照需要的话就是pgl3空载，也可以转个内参，但其实有的文献也没转
不一定有效果，最好根据小鼠基因重新设计。如果大鼠干扰靶点序列不能与小鼠基因CDS序列完全匹配，则干扰效果不佳或者无效果。即使序列完全匹配，大鼠干扰靶点序列由于未经blast，在小鼠中可能会有脱靶效应。
会影响，会影响GFP构象。但是固定用的一般就是醇类、醛类，都会有所影响，但是要用。建议用4%多聚甲醛来固定的，组织一般是过夜固定，注意固定时间不要过长。
可以带上不同的标签蛋白，去做coip。可以构建某个结构域缺失的，然后做coip，看哪个结构域缺失的没有结合，或者单独做这个基因的结构域。
可能是病毒加多了 最好测个moi；还有就是目的基因是不是容易致死，看看对照病毒怎么样，如果这样需要换细胞，或者 换其他的病毒。
AAV5和AAV6，我了解到的一般是2周开始有表达，3-4周表达高峰，可以维持表达3-6个月，如果造模时间长，在2个月左右就补打一次比较靠谱
使用了ADV注射小鼠，但是要6周后才能取样，有什么方法可以延长目的基因的表达时间？
细胞培养一段时间后，有的培养基颜色发生了变化，有点偏黄，有的培养基还是红色，是为什么？
我想用慢病毒做小鼠海马注射，多少量比较合适？多久看结果比较好？
我在文献里看到有人小胶质用ALDH1I1这个启动子的基因鼠，是不是我也可以用这个启动子做载体包aav呢？
设计sgRNA要注意哪些问题？
用puro筛选细胞，筛选完成后，后期培养细胞的时候是不是还要加一定量的puro维持呢？
做敲除发现基因只有一部分被敲除了，还剩一部分，如果继续全部敲除该怎么办啊？
我想问一下，我在网站上预测miRNA跟靶基因的时候，结果里有保守区结合和非保守区结合，这两个有什么区别呢？我做实验的时候应该选哪个比较好？
我买回来的慢病毒lentivirus的质粒，穿梭质粒，想要自己包装，然后重悬了保存，用什么培养基？
看看有没有收录人源的，一般转录因子的结合位点比较保守，所以也可以选择用人源的转录因子预测。或者是其他网站hTFtarget什么的也有结合位点预测功能。