小恒学术问答 » 减肥呀减肥呀
减肥呀减肥呀

用户名:减肥呀减肥呀

注册于:2022-09-28

主题数: 24     回贴数: 15

网站:

介绍:

最后活动于8 å¤©å‰
创建了主题  â€º åšç»†èƒžæ°¸ç”ŸåŒ–推荐什么病毒?

做细胞永生化推荐什么病毒?

«  8 å¤©å‰
创建了主题  â€º åŒè§å…‰ç´ é…¶å®žéªŒå¯åŠ¨å­æ´»æ€§éªŒè¯ï¼Œå¿…须要过表达一个转录因子么?

启动子活性验证,必须要过表达一个转录因子么?

«  8 å¤©å‰
创建了主题  â€º è…ºç›¸å…³ç—…毒(AAV) 注射一次在多长时间内都有敲低/过表达的效果?

腺相关病毒(AAV) 注射一次在多长时间内都有敲低/过表达的效果?

«  8 å¤©å‰
创建了主题  â€º æ…¢ç—…毒(lentivirus)基因组是如何整合到基因组的?是那个范围的序列

慢病毒如何整合到基因组?

«  8 å¤©å‰
创建了主题  â€º æ…¢ç—…毒(lentivirus)感染细胞荧光表达较弱?我应该怎么办

慢病毒(lentivirus)感染细胞荧光表达较弱?我应该怎么办

«  22 å¤©å‰
创建了主题  â€º æ…¢ç—…毒感染效率低怎么办,如何提高慢病毒感染效率?


慢病毒感染效率低怎么办,如何提高慢病毒感染效率?

«  22 å¤©å‰
创建了主题  â€º æ…¢ç—…毒(lentivirus)感染后细胞状态异常?

慢病毒感染后细胞状态异常的原因有什么?

«  22 å¤©å‰
创建了主题  â€º ç”¨äºŽæ…¢ç—…毒感染的细胞接种量多少才合适呢?

用于慢病毒感染的细胞接种量多少才合适呢?

«  22 å¤©å‰
创建了主题  â€º WB 、western blot蛋白条带大小与理论值不符,可能是什么原因?

WB è›‹ç™½æ¡å¸¦å¤§å°ä¸Žç†è®ºå€¼ä¸ç¬¦ï¼Œå¯èƒ½æ˜¯ä»€ä¹ˆåŽŸå› ï¼Ÿ

«  30 å¤©å‰
创建了主题  â€º è§å…‰ç´ é…¶å’Œè§å…‰è›‹ç™½çš„检测仪器相同吗?是一种东西吗?fluc是哪一种?

荧光素酶和荧光蛋白的检测仪器相同吗?是一种东西吗?fluc是哪一种?

«  30 å¤©å‰
创建了主题  â€º è°èƒ½å‘Šè¯‰æˆ‘什么是DIO系统,是怎么运作的,原理是什么

介绍下什么是DIO系统,是怎么运作的,原理是什么?

«  30 å¤©å‰
创建了主题  â€º æ´»ä½“成像推荐什么病毒,腺相关病毒(AAV)可以吗?有什么荧光蛋白能使用?我看有用荧光素酶(luc)和荧光蛋白的比如EGFP、zsGREEN

活体成像推荐什么病毒,腺相关病毒(AAV)可以吗?有什么荧光蛋白能使用?我看有用荧光素酶(luc)和荧光蛋白的比如EGFP、zsGREEN

«  30 å¤©å‰
回复了主题  â€º è¯·é—®å¯ä»¥é€šè¿‡AAV尾静脉注射感染小鼠大脑吗

AAV-BBB的血清型能透过血脑屏障感染大脑的,AAV的其他血清是不具备这个特性,用AAV-BBB携带shRNA尾静脉注射即可

«  30 å¤©å‰
«  2023-02-22
«  2023-02-22
创建了主题  â€º ç¨³è½¬æ ªéƒ½æ˜¯ç”¨ä»€ä¹ˆç—…毒做的?一般稳定株怎么筛选?

稳转株都是用什么病毒做的?一般稳定株怎么筛选?

«  2023-02-22
回复了主题  â€º dCas9区别于Cas9 的是什么?

Cas9 çš„核酸酶剪切活性取决于两个结构域:RuvC å’Œ HNH。这两个结构域分别负责切割
DNA é“¾çš„两条链,并且这两个结构域能够单独地被人工点突变失活。两种突变体的 Cas9 ä»
然具有核酸酶活性,可对靶向序列进行剪切作用。当 RuvC å’Œ HNH åŒæ—¶å¤„于失活状态时,Cas9将不具有核酸酶活性,成为 dCas9(dead Cas9)。dCas9 è™½ç„¶æ²¡æœ‰å‰ªåˆ‡ DNA çš„能力,但仍然可以保留由 gRNA&nbs

«  2023-02-14
回复了主题  â€º è…ºç›¸å…³ç—…毒AAV 辅助质粒的作用是什么?

pAAV-RC:Rep在病毒复制、基因表达调控及宿主染色体定点整合、病毒包装中起重要
作用。Cap通过不同的翻译起始子编码生成包装病毒的外壳。不同血清型的主要区别在于衣
壳蛋白Cap çš„不同,并决定各种血清型 AAV å¯¹ä¸åŒç»„织和细胞有不同的感染效率。应用 AAV2的 ITR ä»¥åŠå…¨éƒ¨æˆ–部分 AAV2 çš„ rep è›‹ç™½ï¼Œæ¢ä¸Šå…¶ä»–血清型 AAV çš„ cap è›‹ç™½ï¼Œå¯ä»¥å¾—到具有各血清型感染特征的杂合 AAV è½½ä½“。

«  2023-02-14
回复了主题  â€º â€‹ç‰¹å¼‚性的启动子和不同血清型的腺相关病毒AAV实现“特异”的基本原理

不同AAV血清型具有不同的衣壳蛋白空间结构、序列和组织特异性,因而其识别与结合的细胞表面受体也相应有很大差别,这也导致不同血清型转染的细胞类型和感染效率也各不相同。
启动子是RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列,它含有聚合酶特异结合和转录起始所需的保守序列,但是它本身并不会被转录。启动子不同的结构会导致与RNA聚合酶的亲和能力有所差异,从而会导致基因的表达水平的不同,组织特异性的启动子又叫器官特异性启动子,可以让某个基因特异的表达在某种组织或者器官中,与感染效率是没有关系的。
所以将上述两个方面结合起来,首先有一个对组织的相对特异性感染,再加上特异性启动子在组

«  2023-02-14
回复了主题  â€º ç»†èƒžçŠ¶æ€ä¸å¥½æœ‰å“ªäº›åŽŸå› ï¼Œå¦‚何判断是黑胶虫污染还是支原体?

细胞碎片:镜下见黑色杂质,大小不均,换液后不见,可能是细胞状态不好(比如原代细胞传代次数过多,新复苏的细胞复苏操作过程不适,冻存条件对细胞损伤大,病毒感染MOI值过大,细胞损伤较重,培养基条件不适,血清比例需要调整等。)。     
细菌污染:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。对培养环境消毒,加抗生素。
霉菌污染:培养液是清亮的,倒置显微镜下无杂质,37度孵箱培养2-3天,仍清亮,但出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,可看到明显的菌丝,

«  2023-02-14
创建了主题  â€º Cas9敲除编码基因和非编码基因有什么区别?

想敲除lncRNA,这个gRNA设计上有什么不同吗?

«  2023-02-06
创建了主题  â€º RNAi干扰,mRNA变化明显但是wb没变化,什么原因?

RNAi干扰,mRNA变化明显但是wb没变化,什么原因?

«  2023-02-06
创建了主题  â€º æ´»ä½“成像的底物选择及注射方式

活体成像的注射方式有哪些,一般是怎么选择底物的?

«  2023-02-06
创建了主题  â€º åšæ´»ä½“成像推荐什么病毒

做活体成像推荐什么病毒

«  2023-02-06
回复了主题  â€º åŒè§å…‰ç´ é…¶æŠ¥å‘ŠåŸºå› ç³»ç»Ÿå¯ä»¥ç”¨æ¥éªŒè¯ç›®çš„基因的干扰效率嘛?

验证目的基因的干扰效率一般是用qPCR的方法,但也可以用双荧光酶素报告基因系统来做的,与验证mir与靶基因结合原理一致,把目的基因当成

«  2022-10-28
回复了主题  â€º è´¨ç²’和病毒的区别是什么?

都是作为载体,将目的序列递送到靶细胞内部。 进入细胞方式不一样:质粒通过转染进入目的细胞,病毒通过感染进入目的细胞,特异性更强,且效率更高; 所搭载的序列形式及其发挥功能的方式可能不一样:质粒

«  2022-10-28
回复了主题  â€º è´¨ç²’和病毒的区别是什么?

都是作为载体,将目的序列递送到靶细胞内部。 进入细胞方式不一样:质粒通过转染进入目的细胞,病毒通过感染进入目的细胞,特异性更强,且效率更高; 所搭载的序列形式及其发挥功能的方式可能不一样:质粒

«  2022-10-28
回复了主题  â€º æ…¢ç—…毒滴度如何检测?

将病毒与293 细胞共

«  2022-10-28