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介ç»ï¼š

æœ€åŽæ´»åŠ¨äºŽ8 å¤©å‰
创建了主题  â€º åšç»†èƒžæ°¸ç”ŸåŒ–推è什么病毒?

åšç»†èƒžæ°¸ç”ŸåŒ–推è什么病毒?

«  8 å¤©å‰
创建了主题  â€º åŒè§å…‰ç´ é…¶å®žéªŒå¯åЍ孿´»æ€§éªŒè¯ï¼Œå¿…é¡»è¦è¿‡è¡¨è¾¾ä¸€ä¸ªè½¬å½•å› å­ä¹ˆï¼Ÿ

å¯åЍ孿´»æ€§éªŒè¯ï¼Œå¿…é¡»è¦è¿‡è¡¨è¾¾ä¸€ä¸ªè½¬å½•å› å­ä¹ˆï¼Ÿ

«  8 å¤©å‰
创建了主题  â€º è…ºç›¸å…³ç—…毒(AAV) 注射一次在多长时间内都有敲低/过表达的效果?

腺相关病毒(AAV) 注射一次在多长时间内都有敲低/过表达的效果?

«  8 å¤©å‰
创建了主题  â€º æ…¢ç—…毒(lentivirus)基因组是如何整åˆåˆ°åŸºå› ç»„的?是那个范围的åºåˆ—

慢病毒如何整åˆåˆ°åŸºå› ç»„?

«  8 å¤©å‰
创建了主题  â€º æ…¢ç—…毒(lentivirus)感染细胞è§å…‰è¡¨è¾¾è¾ƒå¼±ï¼Ÿæˆ‘应该怎么办

慢病毒(lentivirus)感染细胞è§å…‰è¡¨è¾¾è¾ƒå¼±ï¼Ÿæˆ‘应该怎么办

«  22 å¤©å‰
创建了主题  â€º æ…¢ç—…毒感染效率低怎么办,如何æé«˜æ…¢ç—…毒感染效率?


慢病毒感染效率低怎么办,如何æé«˜æ…¢ç—…毒感染效率?

«  22 å¤©å‰
创建了主题  â€º æ…¢ç—…毒(lentivirus)感染åŽç»†èƒžçжæ€å¼‚常?

慢病毒感染åŽç»†èƒžçжæ€å¼‚常的原因有什么?

«  22 å¤©å‰
创建了主题  â€º ç”¨äºŽæ…¢ç—…毒感染的细胞接ç§é‡å¤šå°‘æ‰åˆé€‚呢?

用于慢病毒感染的细胞接ç§é‡å¤šå°‘æ‰åˆé€‚呢?

«  22 å¤©å‰
创建了主题  â€º WB ã€western blot蛋白æ¡å¸¦å¤§å°ä¸Žç†è®ºå€¼ä¸ç¬¦ï¼Œå¯èƒ½æ˜¯ä»€ä¹ˆåŽŸå› ï¼Ÿ

WB è›‹ç™½æ¡å¸¦å¤§å°ä¸Žç†è®ºå€¼ä¸ç¬¦ï¼Œå¯èƒ½æ˜¯ä»€ä¹ˆåŽŸå› ï¼Ÿ

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创建了主题  â€º è§å…‰ç´ é…¶å’Œè§å…‰è›‹ç™½çš„æ£€æµ‹ä»ªå™¨ç›¸åŒå—?是一ç§ä¸œè¥¿å—?fluc是哪一ç§ï¼Ÿ

è§å…‰ç´ é…¶å’Œè§å…‰è›‹ç™½çš„æ£€æµ‹ä»ªå™¨ç›¸åŒå—?是一ç§ä¸œè¥¿å—?fluc是哪一ç§ï¼Ÿ

«  30 å¤©å‰
创建了主题  â€º è°èƒ½å‘Šè¯‰æˆ‘什么是DIO系统,是怎么è¿ä½œçš„ï¼ŒåŽŸç†æ˜¯ä»€ä¹ˆ

介ç»ä¸‹ä»€ä¹ˆæ˜¯DIO系统,是怎么è¿ä½œçš„ï¼ŒåŽŸç†æ˜¯ä»€ä¹ˆï¼Ÿ

«  30 å¤©å‰
创建了主题  â€º æ´»ä½“æˆåƒæŽ¨è什么病毒,腺相关病毒(AAV)å¯ä»¥å—?有什么è§å…‰è›‹ç™½èƒ½ä½¿ç”¨ï¼Ÿæˆ‘看有用è§å…‰ç´ é…¶ï¼ˆluc)和è§å…‰è›‹ç™½çš„æ¯”如EGFPã€zsGREEN

活体æˆåƒæŽ¨è什么病毒,腺相关病毒(AAV)å¯ä»¥å—?有什么è§å…‰è›‹ç™½èƒ½ä½¿ç”¨ï¼Ÿæˆ‘看有用è§å…‰ç´ é…¶ï¼ˆluc)和è§å…‰è›‹ç™½çš„æ¯”如EGFPã€zsGREEN

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回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º è¯·é—®å¯ä»¥é€šè¿‡AAVå°¾é™è„‰æ³¨å°„感染å°é¼ å¤§è„‘å—

AAV-BBB的血清型能é€è¿‡è¡€è„‘å±éšœæ„ŸæŸ“大脑的,AAV的其他血清是ä¸å…·å¤‡è¿™ä¸ªç‰¹æ€§ï¼Œç”¨AAV-BBBæºå¸¦shRNAå°¾é™è„‰æ³¨å°„å³å¯

«  30 å¤©å‰
«  2023-02-22
创建了主题  â€º ç¨³è½¬æ ªéƒ½æ˜¯ç”¨ä»€ä¹ˆç—…毒åšçš„?一般稳定株怎么筛选?

稳转株都是用什么病毒åšçš„?一般稳定株怎么筛选?

«  2023-02-22
回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º dCas9区别于Cas9 的是什么?

Cas9 çš„æ ¸é…¸é…¶å‰ªåˆ‡æ´»æ€§å–决于两个结构域:RuvC å’Œ HNH。这两个结构域分别负责切割
DNA é“¾çš„两æ¡é“¾ï¼Œå¹¶ä¸”这两个结构域能够å•独地被人工点çªå˜å¤±æ´»ã€‚两ç§çªå˜ä½“çš„ Cas9 ä»
然具有核酸酶活性,å¯å¯¹é¶å‘åºåˆ—进行剪切作用。当 RuvC å’Œ HNH åŒæ—¶å¤„äºŽå¤±æ´»çŠ¶æ€æ—¶ï¼ŒCas9å°†ä¸å…·æœ‰æ ¸é…¸é…¶æ´»æ€§ï¼Œæˆä¸º dCas9(dead Cas9)。dCas9 è™½ç„¶æ²¡æœ‰å‰ªåˆ‡ DNA çš„能力,但ä»ç„¶å¯ä»¥ä¿ç•™ç”± gRNA&nbs

«  2023-02-14
回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º è…ºç›¸å…³ç—…毒AAV 辅助质粒的作用是什么?

pAAV-RC:Rep在病毒å¤åˆ¶ã€åŸºå› è¡¨è¾¾è°ƒæŽ§åŠå®¿ä¸»æŸ“色体定点整åˆã€ç—…毒包装中起é‡è¦
作用。Cap通过ä¸åŒçš„翻译起始å­ç¼–ç ç”ŸæˆåŒ…装病毒的外壳。ä¸åŒè¡€æ¸…型的主è¦åŒºåˆ«åœ¨äºŽè¡£
壳蛋白Cap çš„ä¸åŒï¼Œå¹¶å†³å®šå„ç§è¡€æ¸…åž‹ AAV å¯¹ä¸åŒç»„织和细胞有ä¸åŒçš„æ„ŸæŸ“效率。应用 AAV2çš„ ITR ä»¥åŠå…¨éƒ¨æˆ–部分 AAV2 çš„ rep è›‹ç™½ï¼Œæ¢ä¸Šå…¶ä»–血清型 AAV çš„ cap è›‹ç™½ï¼Œå¯ä»¥å¾—到具有å„血清型感染特å¾çš„æ‚åˆ AAV è½½ä½“。

«  2023-02-14
回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º â€‹ç‰¹å¼‚性的å¯åЍå­å’Œä¸åŒè¡€æ¸…型的腺相关病毒AAV实现“特异â€çš„基本原ç†

ä¸åŒAAV血清型具有ä¸åŒçš„衣壳蛋白空间结构ã€åºåˆ—和组织特异性,因而其识别与结åˆçš„细胞表é¢å—体也相应有很大差别,这也导致ä¸åŒè¡€æ¸…型转染的细胞类型和感染效率也å„ä¸ç›¸åŒã€‚
å¯åЍ孿˜¯RNAèšåˆé…¶è¯†åˆ«ã€ç»“åˆå’Œå¼€å§‹è½¬å½•的一段DNAåºåˆ—ï¼Œå®ƒå«æœ‰èšåˆé…¶ç‰¹å¼‚结åˆå’Œè½¬å½•起始所需的ä¿å®ˆåºåˆ—,但是它本身并ä¸ä¼šè¢«è½¬å½•。å¯åЍå­ä¸åŒçš„结构会导致与RNAèšåˆé…¶çš„亲和能力有所差异,从而会导致基因的表达水平的ä¸åŒï¼Œç»„织特异性的å¯åЍå­åˆå«å™¨å®˜ç‰¹å¼‚性å¯åЍå­ï¼Œå¯ä»¥è®©æŸä¸ªåŸºå› ç‰¹å¼‚的表达在æŸç§ç»„织或者器官中,与感染效率是没有关系的。
所以将上述两个方é¢ç»“åˆèµ·æ¥ï¼Œé¦–先有一个对组织的相对特异性感染,å†åŠ ä¸Šç‰¹å¼‚æ€§å¯åЍå­åœ¨ç»„

«  2023-02-14
回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º ç»†èƒžçжæ€ä¸å¥½æœ‰å“ªäº›åŽŸå› ï¼Œå¦‚ä½•åˆ¤æ–­æ˜¯é»‘èƒ¶è™«æ±¡æŸ“è¿˜æ˜¯æ”¯åŽŸä½“ï¼Ÿ

细胞碎片:镜下è§é»‘色æ‚质,大å°ä¸å‡ï¼Œæ¢æ¶²åŽä¸è§ï¼Œå¯èƒ½æ˜¯ç»†èƒžçжæ€ä¸å¥½ï¼ˆæ¯”如原代细胞传代次数过多,新å¤è‹çš„细胞å¤è‹æ“作过程ä¸é€‚,冻存æ¡ä»¶å¯¹ç»†èƒžæŸä¼¤å¤§ï¼Œç—…毒感染MOI值过大,细胞æŸä¼¤è¾ƒé‡ï¼ŒåŸ¹å…»åŸºæ¡ä»¶ä¸é€‚,血清比例需è¦è°ƒæ•´ç­‰ã€‚)。     
ç»†èŒæ±¡æŸ“:细èŒåœ¨æ™®é€šå€’ç½®æ˜¾å¾®é•œä¸‹ä¸ºé»‘è‰²ç»†æ²™çŠ¶ï¼Œæ ¹æ®æ„ŸæŸ“细èŒçš„ä¸åŒï¼Œå¯æœ‰ä¸åŒçš„外形,培养液一般会浑浊å˜é»„ï¼Œå¯¹ç»†èƒžç”Ÿé•¿å½±å“æ˜Žæ˜¾ã€‚对培养环境消毒,加抗生素。
éœ‰èŒæ±¡æŸ“:培养液是清亮的,倒置显微镜下无æ‚质,37度孵箱培养2-3å¤©ï¼Œä»æ¸…亮,但出现絮状æ‚质,镜下å¯è§å‘ˆç»†ä¸çŠ¶çš„å›¢çŠ¶æ¼‚æµ®ç‰©ï¼Œå¯çœ‹åˆ°æ˜Žæ˜¾çš„èŒä¸ï¼Œ

«  2023-02-14
创建了主题  â€º Cas9敲除编ç åŸºå› å’Œéžç¼–ç åŸºå› æœ‰ä»€ä¹ˆåŒºåˆ«ï¼Ÿ

想敲除lncRNA,这个gRNA设计上有什么ä¸åŒå—?

«  2023-02-06
创建了主题  â€º RNAi干扰,mRNAå˜åŒ–明显但是wb没å˜åŒ–,什么原因?

RNAi干扰,mRNAå˜åŒ–明显但是wb没å˜åŒ–,什么原因?

«  2023-02-06
创建了主题  â€º æ´»ä½“æˆåƒçš„åº•ç‰©é€‰æ‹©åŠæ³¨å°„æ–¹å¼

活体æˆåƒçš„æ³¨å°„æ–¹å¼æœ‰å“ªäº›ï¼Œä¸€èˆ¬æ˜¯æ€Žä¹ˆé€‰æ‹©åº•物的?

«  2023-02-06
创建了主题  â€º å𿴻体æˆåƒæŽ¨è什么病毒

åšæ´»ä½“æˆåƒæŽ¨è什么病毒

«  2023-02-06
回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º åŒè§å…‰ç´ é…¶æŠ¥å‘ŠåŸºå› ç³»ç»Ÿå¯ä»¥ç”¨æ¥éªŒè¯ç›®çš„基因的干扰效率嘛?

验è¯ç›®çš„基因的干扰效率一般是用qPCR的方法,但也å¯ä»¥ç”¨åŒè§å…‰é…¶ç´ æŠ¥å‘ŠåŸºå› ç³»ç»Ÿæ¥åšçš„,与验è¯mir与é¶åŸºå› ç»“åˆåŽŸç†ä¸€è‡´ï¼ŒæŠŠç›®çš„基因当æˆ

«  2022-10-28
回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º è´¨ç²’和病毒的区别是什么?

都是作为载体,将目的åºåˆ—递é€åˆ°é¶ç»†èƒžå†…部。 进入细胞方å¼ä¸ä¸€æ ·ï¼šè´¨ç²’通过转染进入目的细胞,病毒通过感染进入目的细胞,特异性更强,且效率更高; 所æ­è½½çš„åºåˆ—å½¢å¼åŠå…¶å‘挥功能的方å¼å¯èƒ½ä¸ä¸€æ ·ï¼šè´¨ç²’

«  2022-10-28
回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º è´¨ç²’和病毒的区别是什么?

都是作为载体,将目的åºåˆ—递é€åˆ°é¶ç»†èƒžå†…部。 进入细胞方å¼ä¸ä¸€æ ·ï¼šè´¨ç²’通过转染进入目的细胞,病毒通过感染进入目的细胞,特异性更强,且效率更高; 所æ­è½½çš„åºåˆ—å½¢å¼åŠå…¶å‘挥功能的方å¼å¯èƒ½ä¸ä¸€æ ·ï¼šè´¨ç²’

«  2022-10-28
回å¤äº†ä¸»é¢˜  â€º æ…¢ç—…毒滴度如何检测?

将病毒与293 细胞共

«  2022-10-28