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炫彩大摆锤

使用带有荧光标记的腺相关病毒（AAV）感染动物组织后，我做了组织石蜡切片，想通过荧光看下感染效率，可以直接观察吗？

动物实验 腺相关病毒AAV 炫彩大摆锤 •  2023-09-08 • 最后回复来自 云梦
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炫彩大摆锤

我通过尾静脉注射AAV-F4/80感染小鼠心脏巨噬细胞，以在巨噬细胞中过表达目的基因，但取心脏组织做qPCR检测未看到目的基因的过表达是什么原因呢？

腺相关病毒 腺相关病毒AAV 过表达 炫彩大摆锤 •  2023-09-08 • 最后回复来自 云梦
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炫彩大摆锤

请问下，U6启动子启动转录序列的第一位必须是G吗？还有U6启动子的适用于哪些种属呢？

sgRNA 干扰 炫彩大摆锤 •  2023-09-08 • 最后回复来自 云梦
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炫彩大摆锤

请问下，质粒也可以构建稳转株，为什么要用慢病毒做呢？

慢病毒 质粒 炫彩大摆锤 •  2023-09-08 • 最后回复来自 云梦
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我想请教一下miRNA的过表达可以用qPCR检测吗？miRNA序列太短了感觉不好设计引物。

miRNA 过表达 炫彩大摆锤 •  2023-05-26 • 最后回复来自 下一班
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炫彩大摆锤

我想用腺相关病毒（AAV）感染小鼠成骨细胞，请问有没有合适的血清型或者启动子？

腺相关病毒AAV 炫彩大摆锤 •  2023-05-26 • 最后回复来自 下一班
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大鼠尾静脉注射跟小鼠相比是不是更容易些？我要注射500ul AAV（腺相关病毒），有什么注意事项吗？

动物实验 腺相关病毒AAV 炫彩大摆锤 •  2023-05-04 • 最后回复来自 下一班
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炫彩大摆锤

我想同时敲低两个基因，可以把这两个基因的siRNA加到一个培养基里面吗？

siRNA 干扰 炫彩大摆锤 •  2023-05-04 • 最后回复来自 下一班
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炫彩大摆锤

我购买了RNAFit转染试剂，在-20度放了一周还可以用吗？

siRNA 干扰 炫彩大摆锤 •  2023-05-04 • 最后回复来自 下一班
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用crispr做knock in实验，插入一个荧光标签蛋白，但最后去看混合克隆荧光的时候，都没有荧光，这要怎么办？

sgRNA 炫彩大摆锤 •  2023-05-04 • 最后回复来自 下一班
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炫彩大摆锤

去找合成公司给我合成启动子，那边说我这个片段很多段发卡结构、GC含量波动很大，合成很难。这可以优化序列吗？

双荧光素酶 炫彩大摆锤 •  2023-05-04 • 最后回复来自 下一班
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想筛稳转，之前摸过MOI，现在同时转crispr慢病毒（lintivirus, LV）跟gRNA慢病毒要不要在原MOI基础上各自减半？

慢病毒 稳转株 炫彩大摆锤 •  2023-04-20 • 最后回复来自 下一班
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转染sirna的时候的时候我用FAM转染试剂摸浓度，最高的那个浓度转染效率有90%，要不要再扩大范围再摸一次浓度啊？

siRNA 炫彩大摆锤 •  2023-04-06 • 最后回复来自 下一班
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我用siRNA处理细胞，qpcr跑出来结果阴性对照NC组也有敲低效率咋办啊？

siRNA 炫彩大摆锤 •  2023-04-06 • 最后回复来自 下一班
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想用AAV（腺相关病毒）带特异性启动子来启动诱导细胞死亡的基因，杀死特定细胞，但这个启动子在其他一些细胞上也会发挥作用，想用两个特异性启动子联合作用，这样可以达到实验目的吗？

腺相关病毒AAV 炫彩大摆锤 •  2023-04-06 • 最后回复来自 下一班
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炫彩大摆锤

做miRNA的过表达，想合成mimics序列来做，是不是合成目的基因的成熟体序列？还是前体序列也可以合成?

mimics 炫彩大摆锤 •  2023-04-06 • 最后回复来自 下一班
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我给ac16人心肌细胞转了sirna，带cy3标签，我们这边有测定荧光吸光度的酶标仪，可以用来测定转染效率吗？

siRNA 荧光 炫彩大摆锤 •  2023-03-10 • 最后回复来自 下一班
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我构建了一个miRNA过表达的慢病毒（lv，lentivirus），那之前检测细胞miRNA表达的时候逆转录用的茎环引物还可以用在用了慢病毒的细胞上吗？

miRNA 慢病毒 炫彩大摆锤 •  2023-03-10 • 最后回复来自 下一班
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使用带荧光素酶luc标签的腺相关病毒AAV做动物实验，把动物处死了，取材还可以拍荧光吗？

aav 动物实验 双荧光素酶 炫彩大摆锤 •  2023-03-10 • 最后回复来自 下一班
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我想做基因敲除（ko，knocout），敲掉肺部巨噬细胞表面的ffar2，但我查了一下，这个蛋白是7次跨膜蛋白，会不会增加敲除难度啊？

sgRNA 基因敲除 细胞 炫彩大摆锤 •  2023-03-09 • 最后回复来自 下一班
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