DREADDs技术原理是通过改变GPCR—乙酰胆碱受体的结构,使其只能被特定的化合物激活或抑制。G
DREADDs的特异性配体是CNO(氯氮平-N-
我们通常提及的逆转录病毒载体是γ-逆转录病毒载体,开发自
ssAAV(单链AAV)载体的病毒基因组是单链
(1)细胞可能被污染了,若发现早可根据具体污染的类型加入抑制污染剂及时补救;
可以的,但通常的干扰序列是shR
腺病毒感染悬浮细胞可采用平角离心转染法,即将适量的病毒液加入细胞培养皿后,封好口,放入平角离心机后,低速(1200g)离心
不是。AAV的不同血清型是由它的Ca
镜下观察发现类似病毒空斑或者细胞聚集的现象时,应继续培养1-3天,观察聚集区域是否扩散,若持续扩散一般为病毒毒斑,若聚集区域保持不变,则一般为细胞聚集
首先是腺病毒基因组的长度较大,达到36kb大小,分子操作难度大,所以包装重组腺病毒的时候通常是将穿梭质粒和骨架质粒共转至细胞中,采取同源重组的方式进行载体的连接、重组。而BJ51
目前科研使用的腺病毒载体经过了一系列的改造,病毒在293
因为siRNA的作用机制是通过RNA
这个需要根据稳转株所带的荧光决定,确保siRNA跟已有的细胞荧光信号不产生重叠,