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云梦

用户名:云梦

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最后活动于13 天前
«  13 天前
«  13 天前
回复了主题  › 做miRNA干扰时,用qPCR检测不到miRNA表达下调是什么原因?

miRNA干扰则基本上不适合用qPCR检测敲低水平,它

«  19 天前
回复了主题  › 自噬有必要做LC3突变么?一般做突变的目的是啥?

现在很少用了,一般不是太必要可以不做。它的目的是作为阴性对照,即使自噬存在的情况下突变型的LC3也不会形成荧光斑点;如果LC3

«  19 天前
回复了主题  › 腺相关病毒产品的安全性如何?

腺相关病毒载体整合几率低,分子量小,免疫原性低,因此安全性高。即使用于人体,也被认为是安全性非常高的一类基因治疗载体。

«  19 天前
回复了主题  › 做miRNA与靶基因双荧光素验证的载体pSI-Check2和pmirGLO有什么区别?

(1)这两个载体的元件大致相同,对于miRNA和靶基因相关的荧光素酶实验来说没什么区别;

«  19 天前
«  27 天前
«  27 天前
«  27 天前
回复了主题  › ChIP实验中需要选择ChIP级别抗体,没有ChIP级别抗体该怎么选择?

ChIP实验首选用ChIP级抗体,是实验成功的关键因素

«  2023-10-27
回复了主题  › 什么是垂悬碱基?有的siRNA添加后有什么作用吗?

垂悬碱基是指在核苷酸序列的端点处存在的不能与mRNA序列相应位置互补的碱基,在实验中,垂悬碱基的存在使端点处更容易发生解链,从而增加基因沉默效率。另一

«  2023-10-27
回复了主题  › 为什么说lncRNA过表达推荐用腺病毒?慢病毒不行吗?

实际上慢病毒和腺病毒都可以用于过表达lnc

«  2023-10-27
回复了主题  › ChIP实验中DNA的检测在什么情况下用PCR反应?什么情况下用测序?

当我们已知蛋白结合的DNA序列的时候,可以使用PCR

«  2023-10-27
创建了主题  › ASO和siRNA有什么区别?


«  2023-10-13
«  2023-09-15
回复了主题  › 使用带有荧光标记的腺相关病毒(AAV)感染动物组织后,我做了组织石蜡切片,想通过荧光看下感染效率,可以直接观察吗?

石蜡切片没法直接观察荧光蛋白的荧光情况,因为在制片的过程中经过多种有机溶剂处理后,会导致荧光蛋白结构改变,无法被激发出荧光;但可以通过免疫荧光染色观察。如果想直接观察到荧光,可以做冰冻切片。


«  2023-09-08
回复了主题  › 我通过尾静脉注射AAV-F4/80感染小鼠心脏巨噬细胞,以在巨噬细胞中过表达目的基因,但取心脏组织做qPCR检测未看到目的基因的过表达是什么原因呢?

感染心脏巨噬细胞建议采用原位注射,效果会比尾静脉注射好很多;另外目标细胞是心脏中的巨噬细胞,取心脏组织做检测并不能反映真实的情况,建议是将巨噬细胞从心脏组织中分离出来再针对巨噬细胞做检测。


«  2023-09-08
回复了主题  › 请问下,质粒也可以构建稳转株,为什么要用慢病毒做呢?

质粒可以随机整合在基因组,但是质粒转染细胞效率不如慢病毒高,且整合概率极低,且容易出现随着细胞传代外源基因丢失的情况。而慢病毒因其感染效率高,且可以长期稳定的整合在基因组,在构建及筛选过程中相比质粒工作量要少一些,且细胞具有在后续传代过程中也不容易丢失。


«  2023-09-08