小恒学术问答
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最后活动于2024-11-25
回复了主题 › 为什么过表达的病毒感染后观察荧光比对照要暗？
基因的插入会影响位于其下游的荧光蛋白等基因的表达。对照病毒或干扰病毒，由于没有插入基因或者插入基因非常短，荧光通常较强。而插入了较长基因之后，荧光的亮度会随着插入基因的长度以及特殊结构的存在等而减弱，尤其是出现高GC
« 2024-11-25
回复了主题 › 我需要同时转染多个质粒，可以这么做吗？
可以的，需多质粒共转染时，可将质粒按一定比例混合，之后根据核酸总量再与转染试剂按照合适的比例混合配置即可。
« 2024-11-25
回复了主题 › 质粒或siRNA做转染时，是否需要使用无血清、双抗的培养基？
质粒或siRNA转染细胞过程中尽量避免使用血清和双抗，以提高转染效率。血清中含有大量的蛋白质，带负电的蛋白质可能干扰阳离子脂质体/
« 2024-11-25
创建了主题 › 实验中慢病毒的干扰效果不好的可能原因有哪些？
« 2024-11-15
创建了主题 › AAV感染肺部常用的注射方法有哪些？
« 2024-11-15
创建了主题 › 基于Cre-loxp原理的敲除小鼠是如何构建的
« 2024-11-15
创建了主题 › 什么是Cre-loxp系统？
« 2024-11-15
回复了主题 › 化学遗传学DREADDs的工作原理是什么？
DREADDs技术原理是通过改变GPCR—乙酰胆碱受体的结构，使其只能被特定的化合物激活或抑制。G
« 2024-11-01
回复了主题 › DREADDs的特异性激活药物有哪些？一般剂量时多少？
DREADDs的特异性配体是CNO（氯氮平-N-
« 2024-11-01
回复了主题 › 有看到说逆转录病毒载体仅适用于感染分裂细胞，这是为什么？
我们通常提及的逆转录病毒载体是γ-逆转录病毒载体，开发自
« 2024-11-01
回复了主题 › ssAAV和scAAV的效果有什么不同吗？
ssAAV（单链AAV）载体的病毒基因组是单链
« 2024-11-01
创建了主题 › 线粒体自噬（mitophagy）指什么？其发生机制是什么？
« 2024-10-18
创建了主题 › Cre-Loxp系统是什么？其作用机制是什么？
« 2024-10-18
创建了主题 › siRNA和shRNA的区别是什么？
« 2024-10-18
创建了主题 › 基于CRISPR/Cas9的细胞敲入的原理是什么？
« 2024-10-18
回复了主题 › 慢病毒包装过程中，细胞出现大量死亡是什么原因？
（1）细胞可能被污染了，若发现早可根据具体污染的类型加入抑制污染剂及时补救；
« 2024-09-20
回复了主题 › 用于过表达的载体可以用来做干扰吗？
可以的，但通常的干扰序列是shR
« 2024-09-20
回复了主题 › 腺病毒感染悬浮细胞怎么操作？
腺病毒感染悬浮细胞可采用平角离心转染法，即将适量的病毒液加入细胞培养皿后，封好口，放入平角离心机后，低速（1200g）离心
« 2024-09-20
回复了主题 › 腺相关病毒（AAV）不同血清型代表什么意思？是和血清有关吗？
不是。AAV的不同血清型是由它的Ca
« 2024-09-20
« 2024-09-13
创建了主题 › 质粒也能构建稳株，为什么要推荐慢病毒做稳转株呢？
« 2024-09-13
创建了主题 › 腺病毒可以用于动物实验吗？在体内可以维持多长时间？
« 2024-09-13
« 2024-09-13
回复了主题 › 腺病毒（adenovirus）包装过程中，怎么区分是病毒感染产生的毒斑还是细胞聚集？
镜下观察发现类似病毒空斑或者细胞聚集的现象时，应继续培养1-3天，观察聚集区域是否扩散，若持续扩散一般为病毒毒斑，若聚集区域保持不变，则一般为细胞聚集
« 2024-09-06
回复了主题 › AdEasy包装系统为什么要在BJ5183感受态中重组？
首先是腺病毒基因组的长度较大，达到36kb大小，分子操作难度大，所以包装重组腺病毒的时候通常是将穿梭质粒和骨架质粒共转至细胞中，采取同源重组的方式进行载体的连接、重组。而BJ51
« 2024-09-06
« 2024-09-06
回复了主题 › 腺病毒（adenovirus）可以复制的，那实验应用的安全性有保障吗？
目前科研使用的腺病毒载体经过了一系列的改造，病毒在293
« 2024-09-06
创建了主题 › 基因敲低的工具有哪些？
« 2024-08-30
创建了主题 › 基因敲低和敲除分别指的是什么？
« 2024-08-30
DTR