我合成的siRNA中有三种对照:cy3阴性对照、阴性对照和阳性对照,都有啥作用呀?我不太会区分。
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橘子
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2024-07-18 •
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我合成的siRNA中有三种对照:cy3阴性对照、阴性对照和阳性对照,都有啥作用呀?我不太会区分。
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最后更新于 2024-07-18
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三种阴性对照的作用如下:
(1)阴性对照siRNA:
siRNA阴性对照(siRNA NC)组,siRNA 阴性对照不靶向任何基因,作为目的基因siRNA组的严格对照组,用于说明 siRNA 作用特异性。
(2)CY3或FAM标记阴性对照siRNA:
带荧光标记的siRNA阴性对照组,与阴性对照siRNA组的区别只在于带有荧光标记,用于指示转染效率,建议最好每一次实验都包含该组。(CY3:激发光550nm,发射光570nm;FAM:激发光492nm,发射光518nm。)
(3)RNAi阳性对照siRNA:
针对管家基因(如GAPDH)或报告基因(如luciferase)等已经验证有效的siRNA,通过对敲低效率的检测,来说明转染效率和检测方法是否正常。