为什么我包装出来的慢病毒的滴度次次都不一样？

慢病毒滴度是用于评估转导一定数量靶细胞所需要的病毒数量。

影响慢病毒滴度的决定因素主要有：1.包装细胞，293T细胞作为常用的包装宿主，其健康状态是影响病毒产量的关键因素，用于慢病毒包装的293T细胞的传代数不宜过高，建议使用30代以内的293T细胞；2.转染效率，选择优化后的转染体系和专用转染试剂提高转染效率；3.插入基因片段大小，慢病毒载体容纳外源基因长度的能力有限，超过3kb就会导致包装效率大大降低，而整个质粒过大，也会导致转染效率降低，进而影响最终的滴度；4.收病毒的时机，转染后的第24 h~48 h是慢病毒的生产高峰，可收获第一批慢病毒，在48 h~72 h，滴度下降，可使用小体积培养基收获1~2次慢病毒，并和第一次收获的慢病毒合并，如果单纯追求高滴度，收获一次即可，大多数时候第一次收获的慢病毒即可满足多次实验需求。