我最近做了我的目的基因的干扰(knockdown,KD),qpcr检测发现敲低效果非常好,但为啥WB检测蛋白变化不明显呢?

By 橘子 at 15 天前 • 0 人收藏 • 67 人看过

我最近做了我的目的基因的干扰(knockdown,KD),qpcr检测发现敲低效果非常好,但为啥WB检测蛋白变化不明显呢?

1 个回复 | 最后更新于 14 天前
14 天前   # 1

根据我的经验来说,我觉得有以下几个原因可参考:
①有些蛋白半衰期长,即使干扰也不一定能被很快降低,可以检测不同时间的比较看看;
②部分蛋白在胞内的翻译有一定效率,干扰降低mRNA,细胞可能进一步提高翻译的效率,导致蛋白受到的影响没有mRNA那么直接;
③蛋白在胞内有一定的代谢率,且是可变的,当表达减少,胞内蛋白降解效率也可能反向调节。

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