做western blot跑蛋白发现条带大小跟理论值不一致，可能是什么原因？

WB的目的蛋白条带与理论值不一样，可能的原因有以下几个：

（1）要确定样品是内源性蛋白还是重组蛋白，如果是重组蛋白，表达的是否是全长

序列，如果不是，条带大小是会有差异的；

（2）可以查看一下目标蛋白是不是由其他转录本，抗原相同的话也会被检测到；

（3）蛋白本身可能存在翻译后修饰，例如糖基化、磷酸化、甲基化等均会增加蛋白的分子量；

（4）如果是条带大小与理论值有明显的倍数关系，可能是形成了二聚体或多聚体；

（5）凝胶浓度选择不当，如果凝胶浓度不适合目标蛋白的大小，可能会影响条带的迁移和分离；

（6）一抗的特异性不足，更换特异性更好的抗体；或者是抗体浓度过高、封闭不完全导致。