从floxp小鼠分离出来的原代细胞，用携带Cre的腺病毒（Adenovirus，AdV）进行感染，但敲除结果非常不理想且不稳定，这种结果的可能原因和解决方案有哪些？

腺病毒属于瞬转，无法将携带的基因整合到宿主的染色体上进行稳定的表达。用腺病毒感染没办法到达100%的感染效率的话，敲除就会不彻底，且后续无法筛选，如果做长期实验，后面细胞的阴性细胞比例会越来越高。结果不稳定很有可能是感染效率不稳定导致的，AdV-Cre病毒的转染只能达到敲低的效果（有感染的阴性细胞），且维持的时间也有期限。如果想实现敲除维持长期效果，一是可以对成功敲除的细胞进行单克隆培养；二是可以试试转染带抗性基因的慢病毒（Lentivirus，LV），在感染之后进行筛选，让宿主细胞稳定表达Cre酶。不过分离的原代细胞一般无法一直传代，这两种方案的可行度也要综合分析。