请问什么是TA克隆(TA cloning)?

By 小脑斧123 at 2024-02-29 • 0 人收藏 • 130 人看过


1 个回复 | 最后更新于 2024-02-29
2024-02-29   # 1

TA克隆技术(TA cloning)利用Taq聚合酶具有末端转移酶(TdT)活性,但却不具有3'-5'端外切酶校准活性的特点,可在PCR产物的3'端加上一个非模板依赖碱基“A”pMD18-T是一种高效克隆PCR产物的专用载体,它是由pUC18载体在XbaISalI识别位点间插入一个EcoRV位点,然后用EcoRV进行酶切使质粒线性化,并在它的3'端添加“T”构建而成。经过特殊处理的T载体是带有3'-T突出端的开环载体,在连接酶的作用下,可以与PCR产物3'末端的非模板依赖A连接,从而把PCR产物直接插入到质粒载体的多克隆位点中。


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