荧光蛋白的种类有很多种,该怎么选呢?

By 梧桐树下 at 2023-12-29 • 0 人收藏 • 121 人看过


1 个回复 | 最后更新于 2024-01-02
2024-01-02   # 1

涉及荧光蛋白应用时,选择合适的荧光蛋白是实验成功关键之一。可以从八个方面考虑:

① 激发峰/发射峰:荧光蛋白激发波长和发射波长要在荧光显微镜的检测范围内,多种荧光蛋白同时使用时,不同荧光蛋白的波长之间需相差50-60nm以上;

② 单体性质:融合表达更推荐用单体荧光蛋白,多聚体会影响目的基因的功能和定位等;

pK值:荧光蛋白的pK值决定其最适pH

④ 亮度:选择亮度高的便于成像和检测;

 光稳定性:便于稳定成像;

⑥ 成熟时间:形成发光基团需要一定的时间;

⑦ 氧气:许多荧光蛋白的成熟需要氧气,特别是衍生自GFP的那些荧光蛋白。

 温度:温度也会影响荧光蛋白的成熟时间和荧光强度,例如EGFP适合在37℃下使用。

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