转染siRNA之后没有干扰效率是怎么回事?
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1.实验操作是否正确:通过荧光标签检测转染效率或者通过对照检查转染和检测程序的正确性。
2.检测时间是否合适:一般在转染siRNA 24-48h后通过qPCR检测干扰效率。
3.细胞状态是否良好:建议选择代数低、密度合适的细胞进行转染,对于不好转染的细胞比如悬浮细胞或干细胞,可以采用电转或者病毒感染的方式。
4.干扰序列是否有效:检查干扰序列设计程序,尝试使用多条siRNA序列。并且siRNA序列容易降解,导致效率下降,siRNA溶解后要分装保存于-20℃。