做WB时,目的条带较弱,因此我延长了曝光时间,导致背景也很高,这种情况是什么原因,该如何调整?

By 云梦 at 2023-10-13 • 0 人收藏 • 100 人看过


1 个回复 | 最后更新于 2023-10-13
2023-10-13   # 1

目的条带较弱可能的原因和调整方法:1)一抗与二抗非特异性结合:可以考虑降低抗体浓度、降低蛋白上样量、增加洗涤次数或者用含脱脂奶粉的TBST稀释抗体,并适当提高去垢剂的浓度;2)封闭不完全:适当延长封闭时间;3)洗涤不充分:适当增加洗涤次数或者适当提高去垢剂的浓度,不要多张膜放在一起洗,容易粘在一起,造成洗涤不充分;3)曝光时间过长:手动调整曝光时间。

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