转染前细胞需要怎样的状态和密度呢?
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biothinker001
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2023-04-07 •
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最后更新于 2023-04-07
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细胞的生长状态会直接影响转染效果。转染前细胞最好经过1-2次传代,细胞良好的生长状态有助于提高转染效率。有些细胞系传代很多次还能够保证很高的转染效率,而其他一些细胞系则传代很少次数转染效率就有显着降低,值得注意的是,贴璧细胞一旦长满就不容易转染了。
用于转染的细胞密度根据不同的细胞类型而异。细胞密度对转染效率的影响比较大。一般在转染时,贴璧细胞密度50%~70%为宜,悬浮细胞密度为2x 10^6--4x 10^6细胞/ml时效果较好。铺板细胞数目的增加可以增加转染活性和细胞产量,对于转染siRNA确保接种贴璧细胞密度在30%-50%左右,悬浮细胞密度为5x 10^5--1x 10^6细胞/ml,对于一些生长缓慢的细胞,接种密度可适当扩大2倍。