WB 蛋白条带大小与理论值不符,可能是什么原因?
①首先要确定您样品是内源性蛋白还是重组蛋白,如果是重组蛋白,表达的是否是全长序列,如果不是,条带大小是会有差异的哦;②如果确定上一条没有问题,那看看目标蛋白是不是有其他转录本,可参考NCBI相应基因信息;③蛋白质本身有修饰如糖基化、磷酸化等均会增大蛋白分子量;④蛋白发生了翻译后剪切,可查阅文献,确认蛋白是否存在多种剪切活性形式;⑤所检测的抗原可能形成了二聚体或多聚体,可以延长煮沸时间,打开蛋白二聚体或多聚体。
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①首先要确定您样品是内源性蛋白还是重组蛋白,如果是重组蛋白,表达的是否是全长
序列,如果不是,条带大小是会有差异的哦;
②如果确定上一条没有问题,那看看目标蛋白是不是有其他转录本,可参考NCBI相应基因信息;
③蛋白质本身有修饰如糖基化、磷酸化等均会增大蛋白分子量;
④蛋白发生了翻译后剪切,可查阅文献,确认蛋白是否存在多种剪切活性形式;
⑤所检测的抗原可能形成了二聚体或多聚体,可以延长煮沸时间,打开蛋白二聚体或
多聚体。