想敲除lncRNA,这个gRNA设计上有什么不同吗?
编码基因依靠3联体密码子来编码蛋白,最终通过蛋白序列来发挥功能,在做敲除的时候,某一个点的改变就可以导致这个序列翻译出来的蛋白序列发生改变,即移码突变,这样的突变就可以导致蛋白功能的丧失。非编码基因是以RNA的形式作用,某个位点发生改变后很难使其丧失功能,除非这个位点是该序列发生作用的唯一位点(这种情况概率极小,相当于是基因组的定点突变),所以非编码的敲除需要在两端各设计一条gRNA来进行片段敲除,但这两条gRNA需要都能有效且同时切割才能敲除成功,所以非编码基因的敲除比较难做。
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编码基因依靠3联体密码子来编码蛋白,最终通过蛋白序列来发挥功能,在做敲除的时候,某一个点的改变就可以导致这个序列翻译出来的蛋白序列发生改变,即移码突变,这样的突变就可以导致蛋白功能的丧失。
非编码基因是以RNA的形式作用,某个位点发生改变后很难使其丧失功能,除非这个位点是该序列发生作用的唯一位点(这种情况概率极小,相当于是基因组的定点突变),所以非编码的敲除需要在两端各设计一条gRNA来进行片段敲除,但这两条gRNA需要都能有效且同时切割才能敲除成功,所以非编码基因的敲除比较难做。