请问转染过质粒的细胞培养两天后全飘起来了，这是什么情况啊?

2015-02-06   # 1

可以从这几个方面考虑：1.培养基是否在转染24小时前换成无双抗的，必须要换2.看清楚质粒提取试剂盒是否去除内毒素。3.如果你用的是Invitrogen Lipofectamine 2000，你需要参照后面的列表来进行实验，同时也要确认你的Lipofectamine 2000是否过期，尽量使用开封半年内的Lipofectamine 2000，因为过了半年后，就算没有过失效期，但是细胞毒性大大增加，而转染效率却大大下降。4.培养板非常容易污染，所以你要排除微生物污染这个可能．5.在转染5小时后（左右）吸去上层液体，换成含血清无双抗的培养基继续培养．6.转染前你培养了多少时间？如果进行顺式转染，必须在细胞生长达到７０－８０％再进行转染7.试试把脂质体剂量减小点，说明书上推荐的浓度通常偏高，可以用较小的剂量试试。各种培养细胞或细胞株对转染试剂的毒性敏感程度不一样,脂质体的毒性大一些,如果是转染试剂的问题,建议使用毒性低一些的转染试剂,如阳离子聚合物转染试剂.