小恒学术问答
» 冯一琳
最后活动于1970-01-01
创建了主题 › 原代细胞可以用慢病毒(lentivirus)筛选稳转株吗
原代细胞可以用慢病毒(lentivirus)筛选稳转株吗
« 2021-01-27
回复了主题 › 大鼠肝细胞BRL慢病毒(lentivirus)感染MOI一般是多少?
BRL细胞比较好转染,慢病毒(lentivirus)感染的MOI一般20左右
« 2021-01-25
创建了主题 › 我想感染小鼠腹腔脂肪,用那种血清型的腺相关病毒AAV好一些?
我想感染小鼠腹腔脂肪,用那种血清型的腺相关病毒AAV好一些?
« 2021-01-25
创建了主题 › 大鼠肝细胞BRL慢病毒(lentivirus)感染MOI一般是多少?
大鼠肝细胞BRL慢病毒(lentivirus)感染MOI一般是多少?
« 2021-01-22
回复了主题 › 人食管腺癌细胞SEG1慢病毒(lentivirus)感染MOI一般是多少?
SEG1细胞不是很好感染,慢病毒MOI建议100左右
« 2021-01-19
回复了主题 › 假病毒包装时有什么办法可以不让包装的病毒基因序列表达
可以在构建载体是不加启动子,这样目的序列不能被启动转录,也就不会表达了
« 2021-01-14
回复了主题 › 构建的质粒上有neor(kanr)抗性基因,这个是什么抗性?
neor(kanr) 是氨基糖苷磷酸转移酶基因,可以使 G418(长那霉素衍生物)失活,是一种常用的真核筛选抗性。
« 2021-01-12
创建了主题 › 小鼠的胃部用那种血清型的腺相关病毒AAV感染效果好一些?
小鼠的胃部用那种血清型的腺相关病毒AAV感染效果好一些?
« 2021-01-07
创建了主题 › 慢病毒(lentivirus)筛选稳转株的过程中,加嘌呤霉素后需要筛选多长时间?
慢病毒(lentivirus)筛选稳转株的过程中,加嘌呤霉素后需要筛选多长时间?
« 2021-01-04
创建了主题 › 人肺腺癌细胞A549慢病毒感染MOI一般是多少?
人肺腺癌细胞A549慢病毒感染MOI一般是多少?
« 2021-01-04
回复了主题 › 人黑色素瘤细胞A375慢病毒(lentivirus)感染MOI是多少?
慢病毒感染的话,MOI推荐10这个范围摸索一下
« 2020-12-30
创建了主题 › 我想特异性感染小鼠大脑小胶质细胞,可以直接用腺相关病毒AAV9直接感染吗
我想特异性感染小鼠大脑小胶质细胞,可以直接用腺相关病毒AAV9直接感染吗
« 2020-12-29
创建了主题 › 小鼠肝脏分离的原代巨噬细胞,慢病毒感染效果好吗
小鼠肝脏分离的原代巨噬细胞,慢病毒感染效果好吗
« 2020-12-28
创建了主题 › 自噬双标病毒是过表达的外源性mcherry-GFP-LC3为什么能检测内源性的自噬水平?
自噬双标病毒是过表达的外源性mcherry-GFP-LC3为什么能检测内源性的自噬水平?
« 2020-12-25
创建了主题 › 大鼠脑胶质瘤细胞C6慢病毒(lentivirus)感染MOI是多少?
大鼠脑胶质瘤细胞C6慢病毒(lentivirus)感染MOI是多少?
« 2020-12-25
回复了主题 › 小鼠成肌细胞系C2C12这个用什么病毒合适?
小鼠成肌细胞系C2C12可以用腺病毒(adenovirus)来感染。
« 2020-12-24
创建了主题 › 小鼠成肌细胞系C2C12这个用什么病毒合适?
小鼠成肌细胞系C2C12这个用什么病毒合适?
« 2020-12-24
创建了主题 › 小鼠上皮样垂体瘤细胞AtT-20慢病毒感染MOI是多少?
小鼠上皮样垂体瘤细胞AtT-20慢病毒感染MOI是多少?
« 2020-12-24
回复了主题 › HepG2细胞,慢病毒(lentivirus)感染的moi是多少
慢病毒(lentivirus)感染HepG2细胞的moi是10
« 2020-12-23
创建了主题 › 慢病毒(lentivirus)感染小鼠单核巨噬细胞白血病细胞raw264.7的MOI是多少?
慢病毒(lentivirus)感染小鼠单核巨噬细胞白血病细胞raw264.7的MOI是多少?
« 2020-12-23
创建了主题 › 注射过腺相关病毒AAV的注射器等物品可以直接扔掉吗
注射过腺相关病毒AAV的注射器等物品可以直接扔掉吗
« 2020-12-22
回复了主题 › 用pEGFP构建融合基因,目的基因序列后面加终止密码子吗
如果用pEGFP-N构建,需要加终止密码子;用pEGFP-C构建,不需要加终止密码子。
« 2020-12-18
回复了主题 › 大鼠脑胶质瘤细胞C6慢病毒(lentivirus)感染MOI一般是多少?
慢病毒MOI推荐100左右
« 2020-12-18
创建了主题 › 人肝癌细胞HepG2质粒转染效率不高,用病毒会好吗
人肝癌细胞HepG2质粒转染效率不高,用病毒会好吗
« 2020-12-17
回复了主题 › 用带puro的质粒或病毒去做crispr/cas9,是直接用嘌呤霉素去筛就可以筛到稳定敲除的了吗?
不可以的,我们在做敲除的时候可以出现多种编辑情况:碱基点突变,indel,用puro筛选只能将转染成功的细胞筛选出来,出来的仍然是一个混合的细胞群体,这些细胞中,有的是敲除成功的,大部分是未成功敲除的,最后还是需要挑单克隆测序才行。
« 2020-12-14
创建了主题 › 活体细胞胞内蛋白可以做免疫荧光标记吗?
活体细胞胞内蛋白可以做免疫荧光标记吗?
« 2020-12-11
回复了主题 › 人胰腺癌细胞CFPAC-1慢病毒(lentivirus)MOI是多少?
慢病毒感染MOI推荐50~80
« 2020-12-10
创建了主题 › 腺相关病毒AAV9只适用于C57小鼠?可以用于balb/C小鼠吗
腺相关病毒AAV9只适用于C57小鼠?可以用于balb/C小鼠吗
« 2020-12-10
回复了主题 › 人子宫内膜癌细胞HEC-1-B慢病毒(lentivirus)感染MOI是多少?
慢病毒MOI推荐2~4
« 2020-12-09
回复了主题 › 几种病毒做cas9敲除有区别吗?做敲除需要稳转吗?
稳转的话,看您的需求了,一般慢病毒的话,可以先构建cas9问稳转株的,再去感染sgRNA的病毒。腺病毒的话,容量比较大,可以把cas9和sgRNA放在一个载体上。感染一次就可以达到效果,避免了两次感染的复杂。aav做cas9的敲除的话,是做在体编辑的,用的是sacas9的。
« 2020-12-08