构建的腺病毒载体pac酶切后,只有一条接近15000bp的条带,怎么解释呀?求大神帮忙

By 冯一琳 at 2015-11-13 • 0 人收藏 • 12331 人看过
构建的腺病毒载体pac酶切后,只有一条接近15000bp的条带,怎么解释呀?求大神帮忙
1 个回复 | 最后更新于 2015-11-13
2015-11-13   # 1
你的腺病毒用的是Adeasy系统吧,pacI酶切是重组后验证的吧。如果是以上情况,重组阳性的PacI酶切应该是3k或者4.5k的条带,如果只有一条条带,证明腺病毒没有重组成功,应该只是穿梭载体。原因可能有以下:1.穿梭载体(track或者shuttle)没有酶切好,没有去磷酸化;2.Bj5183活性有问题,RecA酶活性低3. Adeasy比较大,容易降解。

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