用带puro的质粒或病毒去做crispr/cas9，是直接用嘌呤霉素去筛就可以筛到稳定敲除的了吗？
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MR. 司
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2020-12-14 •
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用带puro的质粒或病毒去做crispr/cas9，是直接用嘌呤霉素去筛就可以筛到稳定敲除的了吗？
1 个回复 |
最后更新于 2020-12-14
冯一琳
2020-12-14
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不可以的，我们在做敲除的时候可以出现多种编辑情况：碱基点突变，indel，用puro筛选只能将转染成功的细胞筛选出来，出来的仍然是一个混合的细胞群体，这些细胞中，有的是敲除成功的，大部分是未成功敲除的，最后还是需要挑单克隆测序才行。
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