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落落

过表达慢病毒效果检测（qPCR、WB）

qPCR WB 慢病毒 过表达 落落 •  9 天前 • 最后回复来自 下一班
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落落

用腺相关病毒（adeno-associated virus，AAV）感染心脏，感染完之后还要做组织免疫荧光（红绿光）染其他指标，怎么选择AAV的荧光呢？

腺相关病毒AAV 荧光 落落 •  9 天前 • 最后回复来自 下一班
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感染了慢病毒（Lentivirus，LV）后分选出来培养的细胞中，在后续传代培养过程中新长出来的细胞会有不带荧光的情况吗？如果会有这种情况怎么继续维持阳性率呢？

慢病毒 稳转株 细胞培养 落落 •  16 天前 • 最后回复来自 下一班
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我想研究一个基因，但在ncbi上查发现有好多转录本，怎么选择研究的转录本呢？

过表达 基因 转录本 落落 •  16 天前 • 最后回复来自 下一班
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请问不同网站启动子序列差很多正常吗？我根据网上教程用ncbi和ucsc都试了下，发现两个序列差了快400bp，ncbi是序列往前推了2000bp，ucsc是取了上游2000bp。

双荧光素酶 启动子 落落 •  16 天前 • 最后回复来自 下一班
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从floxp小鼠分离出来的原代细胞，用携带Cre的腺病毒（Adenovirus，AdV）进行感染，但敲除结果非常不理想且不稳定，这种结果的可能原因和解决方案有哪些？

基因敲除 慢病毒 腺病毒 落落 •  16 天前 • 最后回复来自 下一班
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基于Cre-loxp系统的DIO系统和FLEX系统有什么区别，如果有组织特异性Cre鼠，想在这一组织上特异性表达某个基因，是用哪一种？

aav 过表达 DIO cre-loxp flex 落落 •  2024-03-07 • 最后回复来自 下一班
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做敲低，用siRNA转染细胞有70%-80%的敲低效率，为什么同样的靶点做成shRNA慢病毒（Lentivirus）就检测不到干扰效果呢？

shRNA siRNA 干扰 慢病毒 落落 •  2024-03-07 • 最后回复来自 下一班
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体外实验可以使用带特异性启动子的AAV（adeno-associated virus，腺相关病毒）感染目的细胞吗？就是很多细胞混在一起只感染目的细胞。

aav 动物实验 腺相关病毒AAV 落落 •  2023-10-26 • 最后回复来自 下一班
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质粒（Plasmid）转染细胞，我看好多文章写转染过程中要用无血清的培养基，这是为什么呀？

细胞 细胞转染 质粒 落落 •  2023-10-26 • 最后回复来自 下一班
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质粒内毒素是不是会导致细胞死亡啊？在什么范围内不会对细胞产生影响？

细胞培养 细胞转染 质粒 落落 •  2023-10-26 • 最后回复来自 下一班
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用CRISPR/Cas9技术做敲除小鼠，Cas9和gRNA分别构建了AAV（腺相关病毒）打算尾静脉注射，请问是两个AAV同时注射100μl吗？

aav 动物实验 腺相关病毒AAV 落落 •  2023-10-26 • 最后回复来自 下一班
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microRNA(miRNA)表达量调控怎么检测表达及封闭效果？可以用qPCR吗？

miRNA qPCR 落落 •  2023-09-22 • 最后回复来自 下一班
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落落

我的实验中需要将AAV注射入动物体内，如果买的病毒滴度比较高，要怎么稀释病毒产品，有特殊要求吗？

AAV使用方法 动物实验 实验 腺相关病毒AAV 落落 •  2023-09-22 • 最后回复来自 下一班
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一个细胞可以同时转4条siRNA吗？

siRNA 干扰 细胞 落落 •  2023-09-22 • 最后回复来自 下一班
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请问腺相关病毒AAV会整合到宿主基因组吗？

AAV使用方法 动物实验 腺相关病毒 腺相关病毒AAV 落落 •  2023-09-22 • 最后回复来自 下一班
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我买了一个Cas9的慢病毒（lentivirus）穿梭质粒，打算自己包慢病毒，可以把这个质粒直接转到细胞里先验证下切割活性吗？

cas9 基因敲除 慢病毒 落落 •  2023-09-08 • 最后回复来自 下一班
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落落

我看做miRNA和靶基因结合还可以用自由能预测，如果targetscan预测分数很低但是自由能预测结果还不错，以哪个为准呢？

miRNA 双荧光素酶 落落 •  2023-09-08 • 最后回复来自 下一班
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落落

干扰慢病毒（lentivirus）是根据基因的所有转录本的共同CDS设计的，做完干扰后想做个过表达回补实验，怎么做才能让外源过表达的基因不受干扰序列的影响呢？

干扰 慢病毒 过表达 落落 •  2023-09-08 • 最后回复来自 下一班
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做过表达，qPCR显示有过表达，但是WB没有过表达是为什么啊？

qPCR WB 过表达 落落 •  2023-09-08 • 最后回复来自 下一班
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