单克隆稳转株与混合稳转株有何区别

用BSD来筛选细胞，用什么浓度来筛选？细胞是4T1

最近想直接在细胞表达一个基因，细胞是真核表达系统，所以是否可行。也知道慢病毒可以构建稳转，不知两者效率哪个更高。求大神指点迷津~

是心肌成纤维细胞

染病毒时用的完全培养基加了血清的，会不会是这个原因没有转进去?而且我是要做稳转株筛选。

做嘌呤霉素筛选细胞前的细胞铺板加的培养基是有血清的还是无血清的呢？

请教个问题，有做药物筛选的不，我药物筛选了一个星期了，对照组细胞有百分之95都死了，剩余的长了一两个克隆，实验组也是几个克隆，是不是说明转染的不行或者说药物浓度低了？谢谢~

浓度为0,1,2,3,4,5,6,7,8 ug/mL至培养基，是现配现用，还是几天要用的全部配好后，换液的时候再加进去, 这样的话可以保存多久？

用浓度梯度的选出最终筛选浓度，就是那个浓度梯度需要观察几天来确定最终的最小致死浓度，不是很理解，求大神们指点~跪谢~

是不是转染效率太高，或者是都有了嘌呤抗性，求判断方法、

已做梯度3ug／ml，3天全部死亡。感染48h后筛选3天生长都比较旺盛，尤其刚刚感染的时候。第4天有死亡，第五天存活20%，第八天发现不分裂生长，第九天有死亡现象。是不是感染不成功，这个载体本身不带荧光，所以才做筛选？

细胞感染效率不是非常高，打算用嘌呤筛选下，求给个范围，谢谢~