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底物荧光素（Luciferin）是如何进入小鼠体内的？需要多少？

动物实验 活体成像 luc 下一班 •  5 天前 • 最后回复来自 落落
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我的目的蛋白有一个磷酸化位点，我想生成一个不能磷酸化的目的蛋白载体，是不是可以直接将目的基因相应位点突变掉？要怎么突变呢？

磷酸化 去磷酸化 氨基酸突变 下一班 •  5 天前 • 最后回复来自 落落
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我做siRNA转染，用的含抗生素的培养基会影响干扰效率吗？

siRNA 干扰 细胞 下一班 •  5 天前 • 最后回复来自 落落
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我要做融合蛋白，用荧光蛋白指示细胞中目的蛋白的定位，请问这种情况是什么荧光蛋白都可以融合吗？

细胞 荧光 下一班 •  5 天前 • 最后回复来自 落落
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悬浮细胞做慢病毒（Lentivirus, LV）感染，用24孔板做，初始的接种细胞量一般怎么确定？

悬浮细胞 慢病毒 细胞转染 下一班 •  2024-04-01 • 最后回复来自 落落
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siRNA干扰后（RNAi），目的基因在mRNA水平出现显著下调，但在蛋白水平做WB实验有时能做出轻微变化，有时就感觉没有，这可能有哪些原因？

qPCR siRNA WB 下一班 •  2024-04-01 • 最后回复来自 落落
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我做慢病毒（Lentivirus, LV）感染细胞，慢病毒带了绿色荧光，感染48h之后观察，特别亮的荧光很少，都是很淡的荧光，是不是亮的那种才是感染上了的？淡的不是？

慢病毒 细胞转染 荧光 下一班 •  2024-04-01 • 最后回复来自 落落
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我之前做小鼠某基因的干扰，筛出了一条siRNA效果很好，这条siRNA和人源的同名基因也能完全匹配上，可以直接用来做人源基因的干扰实验吗？

siRNA 干扰 下一班 •  2024-04-01 • 最后回复来自 落落
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siRNA可以打动物吗？我做基因干扰需要补实验，尾静脉注射小鼠，用siRNA是不是实验周期短一点？多久可以达到敲低效果？

siRNA 动物实验 干扰 下一班 •  2024-03-07 • 最后回复来自 落落
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做细胞传代消化时间太长了，可能消化过度了，求问有什么补救措施？

细胞传代 细胞培养 下一班 •  2024-03-07 • 最后回复来自 落落
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脂质体转染细胞的时候为什么不能用含血清的培养基配制转染试剂？

细胞 细胞转染 脂质体 转染试剂 下一班 •  2023-10-13 • 最后回复来自 落落
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用Cas9和gRNA分开的慢病毒（Lentivirus）做敲除细胞系，两个病毒要怎么转染？怎么筛选？

cas9 gRNA 慢病毒 稳转株 下一班 •  2023-10-13 • 最后回复来自 落落
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我想构建带绿色荧光的载体，看到文献有的带GFP，有的带EGFP，GFP和EGFP两种荧光蛋白有什么区别啊？哪个更好？

荧光蛋白 绿色荧光 下一班 •  2023-10-13 • 最后回复来自 落落
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请问saCas9的gRNA筛选为什么比spCas9的更难？

动物实验 基因敲除 下一班 •  2023-10-13 • 最后回复来自 落落
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如果想稳转两个基因到细胞里，有什么可行的方案吗？

慢病毒 细胞转染 过表达 下一班 •  2023-09-15 • 最后回复来自 落落
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我看了篇大鼠同样基因的文献，里面筛选了一条90%以上干扰效率的靶点，这个基因的大鼠和小鼠CDS序列相似度很高，我可不可以直接用这个序列做小鼠基因的干扰？

siRNA 动物实验 干扰 下一班 •  2023-09-15 • 最后回复来自 落落
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针对一个LncRNA设计了几条siRNA做RNAi，但效果都不是很好，可能原因有哪些？

lncRNA siRNA 干扰 下一班 •  2023-09-15 • 最后回复来自 落落
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求助，针对一个基因我合成了三条siRNA，一条NC。相较空白组，NC无显著变化，三条特异性siRNA都出现了不同程度的下调，但！我做的转染试剂的组也出现了显著的下调，那这组数据还能用吗？

siRNA 干扰 转染 下一班 •  2023-09-15 • 最后回复来自 落落
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我做慢病毒包装的时候，包装质粒转染时荧光很亮，但是包装成病毒并感染目的细胞后，荧光很弱，这种是什么原因，是不是表示目的基因表达效率也不高？

慢病毒 荧光 表达效率 下一班 •  2023-08-31 • 最后回复来自 落落
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microRNA做干扰一般怎么检测？也是用qPCR检测microRNA的表达量吗？

miRNA qPCR 下一班 •  2023-08-31 • 最后回复来自 落落
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