做WB时,目的条带较弱,因此我延长了曝光时间,导致背景也很高,这种情况是什么原因,该如何调整?
By
云梦
at
2023-10-13 •
0 人收藏 •
628 人看过
1 个回复 |
最后更新于 2023-10-13
登录后方可回帖
登录后方可回帖
联系我们
返回顶部
小恒学术问答 Powered By © 2006-2022 汉恒生物 All Rights
论坛统计
沪ICP备12028140号
Processed in
12.095 ms,
4 SQL Query(s),
823.8 KiB Memory Usage
目的条带较弱可能的原因和调整方法:1)一抗与二抗非特异性结合:可以考虑降低抗体浓度、降低蛋白上样量、增加洗涤次数或者用含脱脂奶粉的TBST稀释抗体,并适当提高去垢剂的浓度;2)封闭不完全:适当延长封闭时间;3)洗涤不充分:适当增加洗涤次数或者适当提高去垢剂的浓度,不要多张膜放在一起洗,容易粘在一起,造成洗涤不充分;3)曝光时间过长:手动调整曝光时间。