dCas9区别于Cas9的功能是什么？

Cas9的核酸酶剪切活性取决于两个结构域：RuvC和HNH。这两个结构域分别负责切割DNA 链的两条链，并且这两个结构域能够单独地被人工点突变失活。两种突变体的Cas9仍然具有核酸酶活性，可对靶向序列进行剪切作用。当RuvC和HNH同时处于失活状态时，Cas9将不具有核酸酶活性，成为dCas9(dead Cas9)。dCas9虽然没有剪切DNA的能力，但仍然可

以保留由gRNA引导进入基因组的能力。当转录激活子VP64与dCas9融合后，能够促进靶向基因的表达；当转录抑制子KRAB的Kox1结构域与dCas9融合后，能够抑制靶向基因的表达；当没有蛋白与dCas9融合，dCas9则会干扰靶向序列的转录过程。因此，若gRNA识别的基因位点在靶向基因的启动子附近，研究者将可以通过改变dCas9的结构，以实现对靶向基因表达的调控。