我要做慢病毒（lentivirus，LV）干扰，载体为什么不能带 flag，但是可以带 zsgreen、puro呀？

干扰表达的是shRNA，是 RNA 水平的表达，载体转染细胞后表达出 RNA，然后行驶功能。Flag是8个氨基酸构成的短肽，氨基酸是蛋白质的基本单位，需要翻译，flag与蛋白一起翻译，可以看做是一个融合蛋白。所以两者不是一个层次的表达，一个是RNA水平，一个是蛋白水平的表达。而 zsgreen、puro 是蛋白基因，表达的时候使用独立的启动子启动表达，是一个不同于RNA表达的单独表达单位，两者在一个载体上表达，互不影响。