1、CRISPR-Cpf1与CRISPR-Cas9有何不同？

CRISPR-Cpf1与先前的Cas9有一些区别，对研究和治疗具有重要意义。
首先，DNA切割酶Cas9以其天然形式与两个小RNA形成复合物，这两个小RNA都是切割活性所必需的。Cpf1系统更简单，因为它仅需要一个RNA。Cpf1酶也比标准SpCas9小，从而更易于传递到细胞和组织中。
其次，也是最重要的一点，Cpf1以不同于Cas9的方式切割DNA。当Cas9复合物切割DNA时，它会在同一位置切割两条链，留下“平末端”，这些末端通常在重新结合时会发生突变。使用Cpf1复合物时，两条链上的切割是错位的，在暴露的末端留下短的突出端。预期这将有助于精确插入，从而使研究人员可以更有效，更准确地整合DNA片段。
第三，Cpf1切割距离识别位点很远，这意味着即使目标基因在切割位点发生突变，它也可能仍会被重新切割，从而允许进行正确编辑的多种机会。
第四，Cpf1系统为选择目标站点提供了新的灵活性。与Cas9一样，Cpf1复合物必须首先连接到称为PAM的短序列，并且必须选择与天然PAM序列相邻的靶标。Cpf1复合体识别与Cas9不同的PAM序列。这可能是靶向疟疾寄生虫基因组甚至人类基因组的优势。