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我看了篇大鼠同样基因的文献，里面筛选了一条90%以上干扰效率的靶点，这个基因的大鼠和小鼠CDS序列相似度很高，我可不可以直接用这个序列做小鼠基因的干扰？

siRNA 动物实验 干扰 下一班 • 2023-09-15 • 最后回复来自 落落
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下一班

针对一个LncRNA设计了几条siRNA做RNAi，但效果都不是很好，可能原因有哪些？

lncRNA siRNA 干扰 下一班 • 2023-09-15 • 最后回复来自 落落
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下一班

求助，针对一个基因我合成了三条siRNA，一条NC。相较空白组，NC无显著变化，三条特异性siRNA都出现了不同程度的下调，但！我做的转染试剂的组也出现了显著的下调，那这组数据还能用吗？

siRNA 干扰 转染 下一班 • 2023-09-15 • 最后回复来自 落落
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11111_

如何筛选稳定株

慢病毒 稳转株 11111_ • 2023-09-12 • 最后回复来自 橘子
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11111_

AAV载体上带什么荧光标签可以进行活体成像观察

腺相关病毒AAV 荧光 11111_ • 2023-09-12 • 最后回复来自 橘子
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11111_

慢病毒载体转染时荧光很亮，但是包装成病毒并感染目的细胞后，荧光很弱，是什么原因？我的目的基因是不是就没有表达？

慢病毒 荧光 11111_ • 2023-09-12 • 最后回复来自 橘子
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11111_

抗支原体试剂和去黑胶虫试剂如何使用？两种试剂可以一起使用吗？

细胞培养 11111_ • 2023-09-12 • 最后回复来自 橘子
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lemons

病毒感染细胞后，在倒置荧光显微镜下能否观察到绿色荧光？

病毒 荧光 细胞感染 lemons • 2023-09-12 • 最后回复来自 减肥呀减肥呀
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lemons

为什么做 miR 过表达一般只做前体？干扰只做成熟体？

miRNA lemons • 2023-09-12 • 最后回复来自 减肥呀减肥呀
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lemons

双荧光素酶实验为什么只验证结合还做突变体？

miRNA 双荧光素酶 lemons • 2023-09-12 • 最后回复来自 减肥呀减肥呀
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lemons

为什么做 sponge 不建议直接检测 miR，而是直接检测下游靶基因？

miRNA qPCR sponge lemons • 2023-09-12 • 最后回复来自 减肥呀减肥呀
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落落

我买了一个Cas9的慢病毒（lentivirus）穿梭质粒，打算自己包慢病毒，可以把这个质粒直接转到细胞里先验证下切割活性吗？

cas9 基因敲除 慢病毒 落落 • 2023-09-08 • 最后回复来自 下一班
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落落

我看做miRNA和靶基因结合还可以用自由能预测，如果targetscan预测分数很低但是自由能预测结果还不错，以哪个为准呢？

miRNA 双荧光素酶 落落 • 2023-09-08 • 最后回复来自 下一班
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落落

干扰慢病毒（lentivirus）是根据基因的所有转录本的共同CDS设计的，做完干扰后想做个过表达回补实验，怎么做才能让外源过表达的基因不受干扰序列的影响呢？

干扰 慢病毒 过表达 落落 • 2023-09-08 • 最后回复来自 下一班
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落落

做过表达，qPCR显示有过表达，但是WB没有过表达是为什么啊？

qPCR WB 过表达 落落 • 2023-09-08 • 最后回复来自 下一班
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炫彩大摆锤

使用带有荧光标记的腺相关病毒（AAV）感染动物组织后，我做了组织石蜡切片，想通过荧光看下感染效率，可以直接观察吗？

动物实验 腺相关病毒AAV 炫彩大摆锤 • 2023-09-08 • 最后回复来自 云梦
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炫彩大摆锤

我通过尾静脉注射AAV-F4/80感染小鼠心脏巨噬细胞，以在巨噬细胞中过表达目的基因，但取心脏组织做qPCR检测未看到目的基因的过表达是什么原因呢？

腺相关病毒 腺相关病毒AAV 过表达 炫彩大摆锤 • 2023-09-08 • 最后回复来自 云梦
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炫彩大摆锤

请问下，U6启动子启动转录序列的第一位必须是G吗？还有U6启动子的适用于哪些种属呢？

sgRNA 干扰 炫彩大摆锤 • 2023-09-08 • 最后回复来自 云梦
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炫彩大摆锤

请问下，质粒也可以构建稳转株，为什么要用慢病毒做呢？

慢病毒 质粒 炫彩大摆锤 • 2023-09-08 • 最后回复来自 云梦
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nanana

如何筛选稳转株？

慢病毒 稳转株 细胞 荧光 nanana • 2023-09-08 • 最后回复来自 小脑斧123
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