哪个质粒系统做的效果不错，之前一直用的慢病毒，感染效率不太好，做动物实验效果也不好，求大神指点

请教，一般用于心肌细胞基因过表达的慢病毒载体有哪些？后期要用流式检测细胞凋亡，带不带荧光标记呢？带了会不会影响检测结果？

1）是否检测每种细胞表面抗原，比如我要检测CD4/CD8/CD3表面抗原的表达，都应加入对应的同型对照抗体，以设立对应的同型对照组？

2）我需要检测某一种抗原，比如是CD4，但我有5组细胞，分别是细胞A、B、C、D、E，目的是看这5组细胞CD4表达有无或高低，那么是否ABCDE种细胞都应该有各自的同型对照组呢？

是心肌成纤维细胞

染病毒时用的完全培养基加了血清的，会不会是这个原因没有转进去?而且我是要做稳转株筛选。

做嘌呤霉素筛选细胞前的细胞铺板加的培养基是有血清的还是无血清的呢？

一个microrna的序列是22个碱基，那它的cdna引物如果也是22个碱基的话，是不是引物上游或者下游应该有一个和rna序列一致啊？

用的moi=5，10,20，但是文献上和公司资料上最佳MOI值都是10啊，为啥没有光？

aav包装完成后虽然病毒滴度高，但是有没有可能出现很多病毒里面根本没有重组的载体质粒，就是空的病毒，这种现象呢？

前一天拍荧光是这种情况
今天拍荧光是这样。
为啥变这样了呀？？？？求大神指点。