我用ad-easy系统包装腺病毒，想用QPCR的方法测定其滴度，大家设计QPCR引物一般要根据那段序列？有什么原则？谢谢

700岁的病毒遗传物质的复活

一项研究发现，根据来自冰冻在亚北极地区的一个冰区中的700年前的驯鹿粪再造的一个病毒基因组表现出了感染实验室植物的能力。古代病毒遗传物质可能阐释病毒进化，但是完好无损的样本很难从环境中分离出来。

Eric Delwart及其同事分析了加拿大Selwyn山脉的一个冰区通过钻取一层一层积累至4000年前的驯鹿粪得到的冰芯中包含的病毒遗传物质。驯鹿聚集在冰区从而逃避昆虫和夏季热，并且把含有部分消化了的植物材料的粪积累起来。

这组作者从一个700年前的冰芯层中分离出了一个DNA病毒的完整的基因组，它与感染植物和真菌的病毒是远亲，还分离出了一个部分的病毒RNA基因组，它与一种感染昆虫的蟋蟀麻痹病毒有亲缘关系。这些病毒物质在这些粪样本中的出现，提示了这些病毒可能起源于驯鹿食用的植物或者附着在这些物质上的飞行昆虫。这组作者使用一个反向遗传学方法，重建了这个DNA病毒的基因组，从而证实这个病毒是否可能感染植物。用这种古代病毒DNA接种的烟草表现出了感染的证据，包括病毒DNA在接种的和新出现的叶片中的复制。

这组作者说，低温保存的环境样本可能保存了古代病毒遗传物质供今天研究。

原文检索：

Terry Fei Fan Ng, Li-Fang Chen, Yanchen Zhou, Beth Shapiro, Mathias Stiller, Peter D. Heintzman,Arvind Varsani, Nikola O. Kondov, Walt Wong, Xutao Deng, Thomas D. Andrews, Brian J. Moorman,Thomas Meulendyk, Glen MacKay, Robert L. Gilbertson, and Eric Delwart. Preservation of viral genomes in 700-y-old caribou feces from a subarctic ice patch. PNAS, October 27, 2014; doi:10.1073/pnas.1410429111

报道：英国利物浦大学研究人员通过临床试验证明：在华法林初始治疗阶段，采用药物基因组学算法计算出的剂量给药得到的INR值在治疗范围内显著高于标准剂量给药。这一研究结果对指导患者个体化用药，临床提高华法林抗凝初期治疗效果具有重要意义。

                               2013年12月12日《新英格兰医学杂志》

摘要：

背景：华法林在治疗的初始阶段，固定剂量的抗凝作用程度难以预测。本研究在华法林治疗的初始阶段分别采用“基因型指导用量”与“标准剂量”两种不同给药方案比较疗效差异。

方法：我们对心房颤动或静脉血栓栓塞症患者进行多中心、随机、对照试验。采用即时检验法检测CYP2C9*2、CYP2C9*3和维生素K环氧化物还原酶复合物1 (−1639G→A) 基因。基因型指导用量组的患者根据药物基因组学算法制定前5天的华法林用量，对照组以负荷剂量给药3天。初始治疗过后，2组病人均按照临床一般治疗方法制定给药方案。主要评价指标为华法林初始治疗的12周内患者的目标国际标准化比率（INR）为2.0-3.0。

结果：共455名患者参与实验，随机分为2组，其中227人为基因型指导用量组，228人为对照组。基因型指导用量组治疗范围的平均时间百分比为67.4%，对照组为60.3% （调整差异0.07，95%置信区间为3.3-10.6，P<0.001）。基因型指导用量组过度抗凝(INR≥4.0)发生概率明显低于对照组。基因型指导用量组达到治疗范围的INR值所需时间的中位数是21天，而对照组是29天(P<0.001)。

结论：在华法林初始治疗阶段，根据药物基因组学计算的剂量给药得到的INR值在治疗范围内显著高于标准剂量给药。（本研究获得欧盟第七框架计划和其他基金支持；临床试验官方编号NCT01119300）。

原文地址：http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17989110

报道：来自美国斯克里普斯研究所的研究人员发现离子泄露与PAII相关的显性遗传病之间的关系。研究表明离子泄露是功能获得性变异的普遍机制，PAIIs突变体引起离子泄露并通过功能获得性方式引起识别温度敏感不协调，从而使PAIIs对高温的有害影响更为敏感。这一成果将为我们揭示一系列与PAII相关的显性疾病的致病机理。

摘要：PII型ATP酶（PAIIs）由一个保守蛋白家族构成，这种蛋白可以主动使细胞膜两侧形成离子梯度。PAIIs的编码基因发生突变会引起单一等位基因不足的显性遗传病。课题组利用黑腹果蝇基因筛选法鉴别出一个突变体，它可以改变PAII家族的肌浆网钙泵（SERCA）。这一突变体可以通过功能获得性方式引起识别温度敏感不协调。我们通过研究发现这一功能获得性突变表型与显性遗传病件的关联，而这些显性遗传病引起的突变能够影响人体多种PAIIs功能。研究进一步发现，PAIIs突变体的异源表达引起离子泄露，在高温情况下会使离子泄露加重。因此，显性突变引起离子泄露并通过高温使PAIIs对有害影响更为敏感。据此，最近有报道称影响Na+/K+ ATP酶的错义突变可以引起离子泄露。本研究表明离子泄露是功能获得性突变的普遍机制，可以用于解释与PAII相关的一系列显性疾病。

原文地址：http://www.nature.com/ng/journal/v46/n2/full/ng.2850.html

报道：美国斯坦福大学的Valerio Mante等人构建了全新的概括性框架，用于实现情境依赖的计算，进而重构前额皮质的动态活动，从而理解恒河猴在执行相关任务时前额皮质的一系列的动态变化过程。

摘要：前额皮质被认为是大脑灵活性以及情境依赖行为的基础，但是通过计算所呈现出来的这种功能的准确性依然是位置的。事实上，人体的前额皮质神经元通常会显著的产生一些复杂的响应，这些复杂的响应干扰了我们关于这些响应对于动物行为的理解。在本文中，我们研究了恒河猴前额皮质的活动，通过选择和整合一些噪音感官输入去训练这些猴子。我们发现在群体水平上，通过动态过程框架可以很容易的去了解并观察单一神经元的复杂性及其功能，这种群体上的动态性可以通过训练一个重构神经网络来重现出来，这一结果揭示了与选择和整合任务相关输入相关的新机制。该机制表明选择和整合分别代表了相同神经元前额回路动态过程的两个方面，并提出了一个全新的概括性框架用于理解情境依赖的计算。

全文地址：http://www.nature.com/nature/journal/v503/n7474/full/nature12742.html

简介：近日，美国马萨诸塞州波士顿市综合医院再生医学中心Jayaraj Rajagopal的研究团队证实完全分化的分泌细胞具有去分化形成稳定干细胞的功能，这篇文章刊登在最新一期的《Nature》杂志上。

摘要：细胞的可塑性是衡量细胞可塑性是判断植物、无脊椎动物、硬骨鱼类和两栖类等生物组织能否具有再生能力的标准。分化的细胞具有去分化而重新复制、分化的能力最早是在脊椎动物体内被发现,但过去的研究认为去分化形成的细胞不能像正常干细胞一样保持稳定的状态。现在，我们发现呼吸道上皮细胞分化可以在体内去分化形成稳定和有功能性的干细胞。将呼吸道的干细胞经过烧蚀后,我们惊奇的发现已分化为分泌细胞的上皮细胞还能不断增殖。随后的系谱跟踪表明,呼吸道的分泌细胞能去分化为基底干细胞，这些去分化新形成的细胞与干细胞在形态学上无异，并且同样具有修复呼吸道上皮组织损伤的作用。这样，当呼吸道的分泌细胞存在于体内无基底干细胞的环境条件时，可由原先单一功能的细胞经过去分化过程而克隆形成多功能干细胞。相反，只要这些分泌细胞与基底干细胞发生接触，就能有效阻止其发生去分化。将这与有关两栖动物细胞细胞核重编程理论进行类比分析，分化程度越高的细胞发生去分化的能力越弱。细胞去分化的这种能力对组织再生和对造成疾病，特别是在癌症的成因中扮演着非常重要的角色。

全文地址：http://www.nature.com/nature/journal/vaop/ncurrent/full/nature12777.html#affil-auth

在研究中经常会遇到病毒载体工具选择的问题，究竟选择何种病毒载体比较合适？各自又有什么优缺点呢？希望专家可以前来作答~

做神经领域，是不是用AAV病毒载体最好？关于AAV有没有高手详细介绍一下？

哈哈哈哈哈哈哈回家看看考核表吧

慢病毒滴度怎么测，用什么方法呢

慢病毒滴度怎么测，用什么方法呢

慢病毒滴度怎么测，用什么方法呢

慢病毒滴度怎么测，用什么方法呢

慢病毒滴度怎么测，用什么方法呢

怎么找不到资讯啊，全是提问？