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    小叮当
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【专业】 神经生物学
【擅长领域】 细胞生物学
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【个人经历】读完神经生物学的小硕,致力于生物行业的发展,bulabula。。。。。。

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嘌呤霉素药筛稳转株
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慢病毒载体感染肿瘤细胞建系后做裸鼠成瘤,但基因片段很长怎么办?
慢病毒载体,腺病毒载体,腺相关病毒载体(AAV)在应用上有什么区别?各自有什么有缺点?
质粒转染和病毒载体介导转染的区别?各自优缺点?
腺病毒怎么纯化?
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  • 自己包的病毒感染细胞后能看见过表达,但是蛋白表达程度总是不够?怎么优化
    1回答 5564浏览
    293t细胞包装病毒,包装时的10%DMEM中加入1%非必须氨基酸和丙酮酸钠,包装系统是PLVX-PURO(10 μg)、PSPAX2(7.5 μg)、PMD2G(2.5 μg)。在10cm皿中,收取48h(10ml)和72h(10ml)含病毒培养液,混合后用0.22微米的滤膜过滤,分装后保 ... (展开全部)

    293t细胞包装病毒,包装时的10%DMEM中加入1%非必须氨基酸和丙酮酸钠,包装系统是PLVX-PURO(10 μg)、PSPAX2(7.5 μg)、PMD2G(2.5 μg)。在10cm皿中,收取48h(10ml)和72h(10ml)含病毒培养液,混合后用0.22微米的滤膜过滤,分装后保存于-80℃冰箱,使用前化冻,感染时六孔板中细胞融合率大约在50%,病毒体积设置了1ml、3ml、5ml梯度,polybrene浓度为5μg/mL,感染12h后换完全培养液,但是蛋白表达程度并没有随体积而增强,因为加入5ml病毒原液的皿中有很多细胞感染后死亡,所以我感觉病毒量应该够了,想不出原因,有人知道吗?

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    • 慢病毒
    1回答 5564浏览
    2019-11-15
  • 慢病毒载体感染肿瘤细胞建系后做裸鼠成瘤,但基因片段很长怎么办?
    1回答 14082浏览
    我想用慢病毒载体感染肿瘤细胞,构建目的基因过表达的稳转细胞株,以便后续做裸鼠成瘤(皮下成瘤)观察目的基因对肿瘤形成发展的抑制。但是我的目的基因有近5kb,怎么办?

    我想用慢病毒载体感染肿瘤细胞,构建目的基因过表达的稳转细胞株,以便后续做裸鼠成瘤(皮下成瘤)观察目的基因对肿瘤形成发展的抑制。但是我的目的基因有近5kb,怎么办?

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    • 慢病毒
    • 病毒相关动物实验
    1回答 14082浏览
    2015-11-25
  • 慢病毒载体,腺病毒载体,腺相关病毒载体(AAV)在应用上有什么区别?各自有什么有缺点?
    1回答 24460浏览
    在研究中经常会遇到病毒载体工具选择的问题,究竟选择何种病毒载体比较合适?各自又有什么优缺点呢?希望专家可以前来作答~

    在研究中经常会遇到病毒载体工具选择的问题,究竟选择何种病毒载体比较合适?各自又有什么优缺点呢?希望专家可以前来作答~

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    • 慢病毒
    • 腺病毒
    • 腺相关病毒
    1回答 24460浏览
    2015-11-09
  • 质粒转染和病毒载体介导转染的区别?各自优缺点?
    1回答 39402浏览
    无 收起
    • 细胞感染
    • 细胞转染
    1回答 39402浏览
    2015-11-09
  • 慢病毒包装系统中各质粒的比例
    2回答 19240浏览
    使用慢病毒二代包装系统包病毒,PSPAX2、PMD2G和基因载体的比例是多少啊?

    使用慢病毒二代包装系统包病毒,PSPAX2、PMD2G和基因载体的比例是多少啊?

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    • 慢病毒
    2回答 19240浏览
    2014-08-25
  • 腺病毒或慢病毒病毒能否通过血胎屏障进入胎鼠体内?
    1回答 7626浏览
    腺病毒或慢病毒病毒能否通过血胎屏障进入胎鼠体内?

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    • 慢病毒
    • 腺病毒
    1回答 7626浏览
    2014-09-02
  • 慢病毒侵染小鼠海马神经元的问题
    1回答 8282浏览
    用浓缩慢病毒侵染原代小鼠海马神经元时,加入的病毒滴度应该是多少呢?是否需要polybrene?

    用浓缩慢病毒侵染原代小鼠海马神经元时,加入的病毒滴度应该是多少呢?是否需要polybrene?

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    • 慢病毒
    1回答 8282浏览
    2014-08-27
  • 大鼠原代心肌细胞感染腺病毒
    2回答 8168浏览
    大鼠原代心肌细胞感染腺病毒,MOI大致需要多少呢?

    大鼠原代心肌细胞感染腺病毒,MOI大致需要多少呢?

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    • 腺病毒
    2回答 8168浏览
    2014-08-11
  • 单克隆细胞系的构建
    1回答 8480浏览
    转染后已经Puro筛选一周的细胞准备做单克隆建稳定细胞系,种到96孔板的单细胞悬液还需要puro去筛选吗。如果筛选,是用puro原来的筛选浓度还是Puro浓度减半维持

    转染后已经Puro筛选一周的细胞准备做单克隆建稳定细胞系,种到96孔板的单细胞悬液还需要puro去筛选吗。如果筛选,是用puro原来的筛选浓度还是Puro浓度减半维持

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    • 细胞转染
    1回答 8480浏览
    2014-07-14

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