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嘌呤霉素药筛稳转株

病毒感染RAW

慢病毒载体感染肿瘤细胞建系后做裸鼠成瘤，但基因片段很长怎么办？

质粒转染和病毒载体介导转染的区别?各自优缺点？

腺病毒怎么纯化？

大熊学医学回答了
增加扩毒的细胞盘数后浓缩病毒能提高滴度么？

1回答 4062浏览

当然可以啊

当然可以啊
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1回答 4062浏览

27 秒前
大熊学医学回答了
他莫昔芬诱导cre小鼠条件表达的用量是多少？

1回答 4984浏览

你好，具体实验建议自己摸索下条件，不同实验室会有差异很正常。

你好，具体实验建议自己摸索下条件，不同实验室会有差异很正常。
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- 病毒相关动物实验
1回答 4984浏览

1 分钟前
大熊学医学回答了
慢病毒转染大于15000bp质粒的效率如何

1回答 2252浏览

cas9-lenti病毒包装出来是滴度比较低，你可以多包几个皿增加慢病毒滴度！

cas9-lenti病毒包装出来是滴度比较低，你可以多包几个皿增加慢病毒滴度！
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- 慢病毒
- 细胞转染
1回答 2252浏览

2 分钟前
大熊学医学回答了
用293T细胞扩病毒如何提高病毒的滴度呢？

1回答 888浏览

腺病毒吧？要想扩增得到高滴度的腺病毒，要注意：1. 优质的293细胞；2. 感染不足或者过量都会导致扩增得到的腺病毒滴度低；3. 种子病毒滴度不能太低，扩增前检测下种子病毒的滴度是否合适；

腺病毒吧？要想扩增得到高滴度的腺病毒，要注意：1. 优质的293细胞；2. 感染不足或者过量都会导致扩增得到的腺病毒滴度低；3. 种子病毒滴度不能太低，扩增前检测下种子病毒的滴度是否合适；
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1回答 888浏览

3 分钟前
大熊学医学回答了
有一逆转录病毒载体（含目的shRNA）,该怎样选择包装质粒？要进行转化，继而转染癌细胞

1回答 3120浏览

购买逆转录病毒包装体系的时候应该有相应的包装质粒吧？最好用配套的！

购买逆转录病毒包装体系的时候应该有相应的包装质粒吧？最好用配套的！
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1回答 3120浏览

6 分钟前
天使禁猎_1 评论了
请问两种AAV病毒可以同时注射吗？我想注射一个敲除病毒，再注射一个突变体病毒，谢谢

0回答 340浏览

同时可以的，根据你的实验设计来。如果是隔一段时间的话，就要考虑有些动物会产生中和抗体，第二次注射效果比较差。

同时可以的，根据你的实验设计来。如果是隔一段时间的话，就要考虑有些动物会产生中和抗体，第二次注射效果比较差。
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- 病毒相关动物实验
- 腺病毒
0回答 340浏览

1 周前
wuxunxun2015 提问了
请问两种AAV病毒可以同时注射吗？我想注射一个敲除病毒，再注射一个突变体病毒，谢谢

0回答 340浏览

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- 病毒相关动物实验
- 腺病毒
0回答 340浏览

1 周前
大熊学医学回答了
用293T细胞扩病毒如何提高病毒的滴度呢？

1回答 872浏览

跟293质量有关，细胞状态不好严重影响滴度。试试293A细胞，可以问专业的病毒公司购买293a或者293HEK细胞试试，市场上不容易买到质量好的293a细胞。汉恒生物做这一块比较多，可以问问看有没有质量比较好的293细胞出售。

跟293质量有关，细胞状态不好严重影响滴度。试试293A细胞，可以问专业的病毒公司购买293a或者293HEK细胞试试，市场上不容易买到质量好的293a细胞。汉恒生物做这一块比较多，可以问问看有没有质量比较好的293细胞出售。
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1回答 872浏览

18/10
大熊学医学回答了
用293T扩的腺病毒，效果不怎么好？求各路大神指点一下，如何提高滴度

2回答 3838浏览

多种情况都会导致腺病毒扩增不行跟细胞状态，P1代病毒滴度都有关系。

多种情况都会导致腺病毒扩增不行跟细胞状态，P1代病毒滴度都有关系。
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2回答 3838浏览

18/10
大熊学医学回答了
病毒几个结构蛋白的质粒转染细胞，收集细胞上清进行蔗糖密度梯度离心，得到病毒样颗粒用于WB实验。我需要转染多少细胞才能达到我WB的实验需求？

1回答 692浏览

WB实验最低可以1*10的5次方细胞，病毒原液一般滴度是1*10的6次方到1*10的7次方，具体你推算下。

WB实验最低可以1*10的5次方细胞，病毒原液一般滴度是1*10的6次方到1*10的7次方，具体你推算下。
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1回答 692浏览

18/10
大熊学医学回答了
慢病毒转染过表达

1回答 756浏览

可以先做QPCR验证下，但注意RNA抽提时检测下RNA的质量。另外你的目的细胞是什么？哪种启动子？

可以先做QPCR验证下，但注意RNA抽提时检测下RNA的质量。另外你的目的细胞是什么？哪种启动子？
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- 慢病毒
- 细胞感染
1回答 756浏览

18/10
大熊学医学回答了
跪求各位大神指点，看文献一般要求MOI=5或10，如果是这样加1ul病毒原液（TCID50=10-7.876/0.1ml）至6孔板就能达到这个要求，但是师姐们都采用加200 TCID50浓度1ml病毒液进行试验，但是如果按这个计算病毒液的话，和MOI算出来差了一个103个数量级，急求各位大师指点，我是哪里弄错了

1回答 432浏览

即使同一种细胞，细胞状态不一样的情况下MOI值也会有比较大的偏差。另外病毒滴度跟保存时间和方法也有比较大的关系，因此建议包装好病毒之后或者拿到商业化的病毒后，重新摸索MOI

即使同一种细胞，细胞状态不一样的情况下MOI值也会有比较大的偏差。另外病毒滴度跟保存时间和方法也有比较大的关系，因此建议包装好病毒之后或者拿到商业化的病毒后，重新摸索MOI
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1回答 432浏览

18/10
大熊学医学回答了
请问不同血清型AAV病毒包装时的区别是什么？

1回答 1316浏览

跟AAV-RC质粒类型有关，是AAV文库体内实验筛选出来的

跟AAV-RC质粒类型有关，是AAV文库体内实验筛选出来的
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- AAV
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18/10
hedgehogbio 评论了
请问不同血清型AAV病毒包装时的区别是什么？

1回答 1316浏览

不同包装质粒，会得到不同的血清型，我们有pAAV2，5，6，9，

不同包装质粒，会得到不同的血清型，我们有pAAV2，5，6，9，
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- AAV
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15/10
糯米丸子提问了
跪求各位大神指点，看文献一般要求MOI=5或10，如果是这样加1ul病毒原液（TCID50=10-7.876/0.1ml）至6孔板就能达到这个要求，但是师姐们都采用加200 TCID50浓度1ml病毒液进行试验，但是如果按这个计算病毒液的话，和MOI算出来差了一个103个数量级，急求各位大师指点，我是哪里弄错了

1回答 432浏览

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1回答 432浏览

07/10
追逐提问了
慢病毒转染过表达

1回答 756浏览

从公司买的慢病毒，看了说明书慢病毒感染细胞不要超过24小时，实验室师兄说可感染72小时都没事，只要细胞状态可以，我感染了48小时后换成正常培养基，细胞状态差点，48小时荧光已经很强，但今天做WB和contral组比没有差别（3组不同的细胞系），是不是感染时间太长，影响蛋白的合成，还是病毒的问 ... (展开全部)

从公司买的慢病毒，看了说明书慢病毒感染细胞不要超过24小时，实验室师兄说可感染72小时都没事，只要细胞状态可以，我感染了48小时后换成正常培养基，细胞状态差点，48小时荧光已经很强，但今天做WB和contral组比没有差别（3组不同的细胞系），是不是感染时间太长，影响蛋白的合成，还是病毒的问题？（我的是分泌蛋白，细胞中表达量高，抗体CST的一秒就爆了）

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- 慢病毒
- 细胞感染
1回答 756浏览

29/08
corrine 提问了
病毒几个结构蛋白的质粒转染细胞，收集细胞上清进行蔗糖密度梯度离心，得到病毒样颗粒用于WB实验。我需要转染多少细胞才能达到我WB的实验需求？

1回答 692浏览

我构建了新城疫病毒几个结构蛋白的质粒，据文献报导将这几个质粒共转染细胞，细胞上清中会含有病毒粒子。我想收集细胞上清，通过蔗糖密度梯度离心得到病毒粒子用于WB。想问问大家我如果通过蔗糖密度梯度离心得到病毒粒子，我质粒需要转染几皿细胞（10毫升）才能满足收集到的病毒粒子跑WB？

我构建了新城疫病毒几个结构蛋白的质粒，据文献报导将这几个质粒共转染细胞，细胞上清中会含有病毒粒子。我想收集细胞上清，通过蔗糖密度梯度离心得到病毒粒子用于WB。想问问大家我如果通过蔗糖密度梯度离心得到病毒粒子，我质粒需要转染几皿细胞（10毫升）才能满足收集到的病毒粒子跑WB？
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1回答 692浏览

26/08
Jane 评论了
用293T扩的腺病毒，效果不怎么好？求各路大神指点一下，如何提高滴度

2回答 3838浏览

你好，细胞冻融时用-80°冰箱应该冻多久呢？怎样才能冻融充分呢？

你好，细胞冻融时用-80°冰箱应该冻多久呢？怎样才能冻融充分呢？
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2回答 3838浏览

15/08
Jane 提问了
用293T细胞扩病毒如何提高病毒的滴度呢？

1回答 888浏览

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1回答 888浏览

15/08
Jane 提问了
用293T细胞扩病毒如何提高病毒的滴度呢？

1回答 872浏览

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1回答 872浏览

15/08

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